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非锚着依赖性生长文献资料
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PRDM5基因抑制前列腺癌细胞22Rv1生长
目的 探讨PRDM5基因在前列腺癌细胞中的抑癌作用.方法 采用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶酶切、T4 DNA连接酶连接等方法,克隆PRDM5基因并插入慢病毒载体中.将携带PRDM5基因的慢病毒质粒(或阴性对照质粒)与慢病毒包装质粒通过脂质体法共转染293T细胞,收集病毒上清,感染人前列腺癌细胞株22Rv1.用蛋白质印迹法检测细胞PRDM5的表达,细胞倍增实验和平板克隆实验检测细胞增殖和克隆形成能力,软琼脂克隆形成实验检测细胞非锚着依赖性生长能力.结果 成功构建PRDM5重组慢病毒载体,并包装获得慢病毒上清.将PRDM5重组慢病毒载体感染22Rv1细胞后,筛选得到稳定表达细胞株,蛋白质印迹法结果显示该细胞株能稳定表达外源性PRDM5蛋白.过表达PRDM5的前列腺癌22Rv1细胞的增殖能力[倍增时间:(52.5±1.4)h vs (44.0±1.3) h]、克隆形成能力[克隆形成数:(1 114±98)/皿 vs(1 361±123)/皿]和非锚着依赖性生长能力[克隆形成数:(94.6±8.7)/孔vs (154.0±3.5)/孔]均低于阴性对照组(P＜0.05).结论 前列腺癌22Rv1细胞中PRDM5的过表达具有抑制肿瘤细胞增殖、克隆形成和非锚着依赖性生长的能力.
