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gel-shift试验文献资料
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hTRIP 15对甲状腺激素受体功能的影响
目的确立人甲状腺激素受体相互作用蛋白15(hTRIP 15) 对甲状腺激素受体(TR) 功能的影响.方法应用融合蛋白、蛋白体外翻译及谷胱苷肽S转移酶"拉下"(GST pulldown)试验研究蛋白-蛋白的相互作用,凝胶阻滞(gel-shift)试验检测蛋白-DNA的结合活性.结果经大肠杆菌表达hTRIP 15融合蛋白或体外翻译TRα所显示的分子量与预测大小相吻合.hTRIP 15及hTRIP 15-N末端均可与TRα相互作用; hTRIP 15抑制TR与TR反应元件(TRE)结合,且增加hTRIP 15剂量时更明显.结论提示hTRIP 15作为共抑制因子调节TR对靶基因的转录,hTRIP 15-N端是TR结合功能域,而C端可能为调节功能域.
