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流式筛选文献资料
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快速获得和纯化骨髓基质干细胞的方法
目的 研究在体外快速获得骨髓基质干细胞及纯化的方法.方法 采用流式细胞仪筛选法获得CD45-、CD90+原代细胞,复合胶原酶差速消化逐级传代、纯化;对第3代(P3代)细胞进行脂肪细胞、软骨细胞、骨细胞三向诱导;2~4周后,分别行oil red'O、Safranin'O和茜素红染色,倒置显微镜下观察诱导结果.结果 经流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化,传代至P3代,细胞形态已呈现均一性.向脂肪细胞诱导后第4周,oil red'O染色见细胞内大量红染的脂滴;向软骨细胞诱导后第4周,Safranin'O染色见多数切片呈阳性,细胞团块中存在大量软骨特异性的陷窝样结构;向骨细胞诱导后第4周,茜素红染色发现肉眼可见广泛散在的红色阳性钙结节.结论 本研究所采用的流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化法,可快速获得高纯度的骨髓基质干细胞.