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磷脂酶D1对胰腺癌细胞增殖的影响
目的 探究磷脂酶D1(PLD1)对于胰腺癌细胞增殖的影响.方法 通过CCK-8法、EdU荧光染色和流式细胞术检测PLD、PLD1及PLD2抑制剂对胰腺癌细胞系Capan-2细胞活力、增殖、周期的影响;采用同样方法检测抑制/过表达PLD1对Capan-2细胞活力、增殖、周期的影响.结果 PLD、PLD1抑制剂均抑制了Capan-2增殖(P＝0. 004、0. 044),而PLD2抑制剂对Capan-2增殖无明显影响(P＝0. 945).下调PLD1的表达使Capan-2细胞活力降低(P＝0. 000)、增殖能力减弱(P＝0. 002),阻碍了细胞周期进展(P＝0. 004、0. 002);上调PLD1的表达使Capan-2细胞活力提高(P＝0. 004)、增殖能力增强(P＝0. 002),促进细胞周期进展( P＝0. 000 4、0. 035).结论 PLD1能够促进胰腺癌细胞的增殖,在胰腺癌的发展中发挥着重要的作用.
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磷脂酶D1基因mRNA在前列腺癌细胞雄激素非依赖性转化中的作用分析
目的 探讨磷脂酶D1(phospholipase D1,PLD1)mRNA在前列腺癌细胞雄激素非依赖性转化中的作用.方法 利用Arraystar Human LncRNA Microarray V3.0基因芯片,比较了前列腺癌标准株细胞LNCaP在发生雄激素非依赖性转化前后的mRNA和lncRNA的差异表达,分析表达显著的PLD1 mRNA及其信号通路的相关基因,检测PLD1 mRNA表达受相应shRNA慢病毒载体抑制后LNCaP细胞增殖能力的改变.结果 LNCaP细胞在雄激素非依赖性转化后其PLD1 mRNA升高373倍(P＜0.05),PI3 K/AKT信号途径的有关mRNA表达升高;在其PLD1 mRNA表达受慢病毒抑制后,与空白对照和阴性对照组比较,其生长率下降了近30％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PLD1 mRNA及其有关的PI3K/AKT信号通路在前列腺癌细胞雄激素非依赖性中可能存在重要作用,下调PLD1 mRNA的表达能在一定程度上抑制前列腺癌细胞雄激素非依赖转化后的增殖速度.
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磷脂酶D1在乳腺癌细胞中的表达及雷公藤甲素的干预作用
目的:探讨磷脂酶D1(PLD1)在不同乳腺癌细胞中的表达情况以及雷公藤甲素(TP)对人乳腺癌细胞PLD1表达的影响.方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231和小鼠乳腺癌细胞4T1,以人乳腺上皮细胞MCF10A为对照,采用半定量RT-PCR测定PLD1 mRNA表达水平,Western blot法测定PLD1蛋白表达水平,并分别测定不同浓度TP对PLD1及细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA和蛋白的表达水平的影响.结果:半定量RT-PCR和Western blot分析均显示,PLD1 mRNA和蛋白在乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231和4T1中的表达显著高于乳腺上皮细胞MCF10A,其中MDA-MB-231细胞PLD1蛋白表达水平约为MCF10A细胞的20倍.TP抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的同时下调PLD1和cyclin D1表达水平,并且呈一定浓度依赖性.结论:相比乳腺正常上皮细胞,PLD1 mRNA和蛋白在乳腺癌细胞中表达增高,TP抑制乳腺癌细胞增殖的作用机制与其抑制PLD1的表达有关.
