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实时反转录-多聚酶链反应文献资料
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重症急性胰腺炎大鼠胰腺全基因表达谱的变化
目的 观察牛磺胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺基因表达谱的变化.方法 40只SD大鼠随机分为假手术组和SAP模型组,每组20只.经胰胆管逆行注射4％牛磺胆酸钠复制SAP模型,假手术组注射生理盐水,造模48 h后处死动物.检测血清淀粉酶和C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平；H-E染色观察胰腺和肺组织病理变化；Illumina大鼠全基因组表达谱基因芯片分析胰腺表达谱变化；实时反转录-多聚酶链反应(Real-Time reverse transcription PCR,RT-PCR)验证部分基因(F11r、Cdh1).结果 SAP模型组血清淀粉酶、CRP明显高于假手术组[(7 892±1 776.0)vs (1 296±326.2)U·L-1,P＜0.0t;(106.5±19.9)vs (61.7±15.9) μg·ml-1,P＜0.01)]；Schmidt胰腺病理半定量积分法显示,SAP组胰腺坏死、出血、炎性细胞浸润、水肿指数等较假手术组明显(均P ＜0.01).与假手术组相比,胰腺组织表达谱28个基因表达明显变化,其中下调5个,上调23个.基因功能分析显示其与细胞黏附分子通路、钙钾离子通道、促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、脂肪酸代谢等密切相关.RT-PCR对涉及细胞黏附的F11r、Cdh1基因的验证证实了芯片结果.结论 牛磺胆酸钠诱导的SAP大鼠基因表达谱改变涉及到细胞黏附、钙钾离子通道、MAPK信号通路和脂肪酸代谢.
关键词： 重症急性胰腺炎 基因芯片 表达谱 实时反转录-多聚酶链反应
