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分枝杆菌降解β-谷甾醇制备雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮
目的以β-谷甾醇为原料制备雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD).方法利用Mycobacterium phlei93201为出发菌株对β-谷甾醇进行选择性边链降解制备ADD.对发酵条件如培养基组成、pH和投料时间及转化条件如投料浓度、投料方法和9α-羟化酶抑制剂等进行摸索以提高ADD产量.结果当投料浓度为0.2%时,转化率达50%.结论在9α-羟化酶抑制剂2,2'-联吡啶存在时,Mycobacterium phlei 93201能有效地将β-谷甾醇降解为雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮.
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利用双水相系统转化雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮的研究
利用混合植物甾醇(45%β-谷甾醇,30%豆甾醇,25%菜油甾醇)作为底物筛选适合菌株Mycobacteri-um HCCB006转化生成雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)的双水相系统,并用表面活性剂对系统进行进一步的优化.经初步研究得到的佳转化系统为16%PEG20000/4%Dextran20 000/8%OP,从而使得在底物加量为1%时ADD的产量达到2.858g/L.
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快速分析测定大豆甾醇侧链降解底物的方法
建立了快速分析测定大豆甾醇侧链降解过程中底物大豆甾醇和产物雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)及雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)的方法.采用薄板层析(TLC),在板层为硅胶60GF254,流动相为石油醚-乙酸乙酯(6:4)的条件下,成功的分离了底物与产物,从而能快速简便的监测底物的消耗与产物的生成情况.另外根据底物与产物AD与ADD在紫外区的吸收情况,利用254nm与298nm双波长测定ADD与AD的生成量.上述两种方法便于工厂对生产情况的同步检测.
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转化黄体酮菌株的筛选及转化产物研究?
目的：用微生物转化的方法获得新型的黄体酮类衍生物,对于相关新药的研发至关重要。方法通过微生物转化,利用薄层层析法(TLC)和硫酸显色法跟踪监测,筛选能够有效转化黄体酮的菌株,然后通过硅胶柱层析法对发酵液中的转化产物进行分离纯化,将纯化产物进行质谱、红外光谱和核磁共振谱表征,确定转化产物的物质结构。结果本研究筛选到了1株真菌,通过分子生物学鉴定其为 Fusarium 属,该菌能够完全转化底物黄体酮,同时得到2种重要的药物中间体：雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮和睾内酯。结论本研究筛选得到的这株菌对大规模发酵生产雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮和睾内酯具有潜在的应用价值。
