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HBV感染对趋化因子CCL20表达的影响及其意义(摘要)
目的研究HBV不同感染状态对CCL20表达水平的影响,探讨CCL20在乙肝病毒感染中的作用.方法通过基因体外转染技术,建立HBV不同感染状态的肝细胞模型;以内对照定量RT-PCR检测HBV不同感染状态下CCL20的表达水平.结果HBV不同感染状态下CCL20的表达水平不同,HBV未感染肝细胞CCL20表达水平每106细胞为(2.65±0.02)pg/10μL,HBV短暂感染肝细胞CCL20的表达水平每106细胞为(3.43±0.02)pg/10μL,而HBV持续感染肝细胞CCL20的表达水平每106细胞为(1.22±0.04)pg/10 μL,上述三种不同感染状态下肝细胞表达CCL20的水平差异有统计学意义,表现为HBV短暂感染肝细胞＞未感染肝细胞＞HBV持续性感染肝细胞(P＜0.05).在HBV同一感染状态下,CCL20的表达水平与HBV感染时间、细胞的培养时间、病毒载量等因素未见显著性相关;上述细胞经乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)活化后,相应细胞CCL20表达均明显增加(P＜0.05),但并不改变CCL20在各细胞中的表达格局.结论HBV的不同感染状态影响了CCL20的表达.
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PMA诱导的THP-1细胞分化过程中MMP-9及MMP-2的表达与细胞侵蚀性的关系
目的: 应用单核细胞THP-1株建立单核细胞向巨噬细胞分化的体外模型, 并探讨THP-1细胞分化过程中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达与细胞侵蚀性的关系以及巨噬细胞在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用.方法: 用乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA) 诱导THP-1细胞向成熟的单核-巨噬细胞分化后, 采用倒置显微镜观察分化细胞的形态学变化.用流式细胞术测定细胞表面特异性抗原CD14的表达.采用明胶酶谱(gelatin-zymogram)分析法测定分化前后THP-1细胞中MMP-9和MMP-2的表达.采用侵蚀性小室(Boyden Chamber-Matrigel人工重组基底膜)法, 观察分化前后的THP-1细胞侵蚀性的变化.结果: THP-1细胞向单核-巨噬细胞分化过程中, 细胞由分散、悬浮转变为黏附、贴壁, 且出现CD14的高表达.分化后的THP-1细胞中MMP-9和MMP-2的表达明显增多, 侵蚀性明显增强.结论: 建立了THP-1单核细胞的体外分化模型.该细胞在分化过程中, MMP-9和MMP-2的表达增多、侵蚀性增强, 为巨噬细胞在RA发病机制的作用提供了一定的实验依据.
