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白念珠菌CDR1基因表达与氟康唑耐药的关系
目的了解在白念珠菌氟康唑耐药或敏感菌株中CDR1基因的表达情况.方法抽提氟康唑耐药/敏感菌株的RNA,采用Northern blot技术观察CDR1基因的表达.结果白念珠菌耐药菌株CDR1基因的表达量明显高于对应的敏感菌株.结论白念珠菌CDR1基因的高表达与氟康唑耐药有关.
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FLC与FK506联用对光滑念珠菌耐药性及CDR1、ABC转运蛋白表达的影响
目的:探究氟康唑(FLC)和他克莫司(FK506)联用对光滑念珠菌耐药性及CDR1、ABC转运蛋白表达的影响.方法:选择临床分离的耐药性光滑念珠菌,采用体外微量稀释法测量FLC和FK506联用对光滑念珠菌的体外静态抗真菌作用,选择部分抑菌浓度指数和FICI法对结果进行评价分析.采用RT-PCR法检测药物联合干预后光滑念珠菌耐药基因CDR1的相对表达量,通过测定菌株细胞外液FDA浓度来对ABC转运蛋白的外排情况进行间接观察.结果:FK506的加入使得对FLC耐药光滑念珠菌的MIC值在24 h作用时降低至原来的1/8,在48 h作用时降低至原来的1/16,FLC和FK506联合用药抗光滑念珠菌在24 h和48 h作用的FICI值分别为0.089、0.124,均＜0.5,表明FLC与FK506联用对光滑念珠菌具有较强的协同作用.与未加药组相比,FLC与FK506单独用药后CDR1基因的表达水平无明显增加(P＞0.05),FDA的细胞外液浓度升高水平降低(P＜0.05),且FLC与FK506联合用药后FDA细胞外液浓度的升高水平低于各自单独用药后,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:FLC与FK506联用能协同抗光滑念珠菌,有效克服其对FLC的耐药性,其机制可能与降低CDR1基因及ABC转运蛋白的表达量有关.
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阴道白假丝酵母菌的耐药性与ABC转运蛋白基因表达的关系研究
目的:探讨白假丝酵母菌中cdr1、cdr2基因表达水平与菌株对吡咯类药物敏感性下降的关系.方法:收集白假丝酵母菌感染患者的菌株60株,用科玛嘉念珠菌显色培养基作菌种鉴定,纸片扩散法进行药敏试验;实时定量PCR方法检测菌株中cdr1和cdr2的表达水平,并进行统计分析.结果:60株白假丝酵母菌中,38株为中度敏感或耐药株,其中12株菌株对氟康唑、酮康唑和咪康唑中度敏感或耐药,14株菌株对酮康唑和咪康唑中度敏感或耐药;氟康唑中度敏感或耐药组cdr1、cdr2相对表达量显著高于敏感组,酮康唑中度敏感或耐药组和咪康唑中度敏感或耐药组cdr1、cdr2相对表达量与敏感组比较,差异无统计学意义.结论:部分白假丝酵母菌耐药为多重耐药;cdr1及cdr2的高表达与临床白假丝酵母菌对氟康唑耐药有关,cdr1及cdr2的表达量与临床白假丝酵母菌对酮康唑或咪康唑耐药无关.
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白色念珠菌upc2基因G1927A多态性与唑类药物耐药的关系
目的 探讨白色念珠菌upc2基因C末端单核苷酸多态性以及其对唑类药物耐药的影响.方法 对34株白色念珠菌临床株,纸片法测定5种药物敏感性,DNA测序法检测upc2基因单核苷酸多态性,RT-PCR法测定cdr1基因mRNA转录水平.比较耐药株和敏感株upc2单核苷酸多态性以及cdr1基因mRNA水平的差异.结果 14株白色念珠菌氟康唑耐药株(3株多重耐药,6株双重耐药,5株单一耐药),20株敏感株对5种药物均敏感.5株耐药白色念珠菌upc2基因存在G1927A型多态性,20株敏感株upc2基因均为G1927野生型,G1927A型upc2基因检出率35.7％,显著高于敏感株(x2=8.37,P＜0.01).G1927A型多重耐药株的cdr1基因mRNA水平高于G1927A型双重耐药株,并且二者均高于敏感株.结论 upc2基因G1927A单核苷酸多态性通过上调cdr1基因mRNA转录而引起白色念珠菌对唑类药物产生多重耐药或双重耐药表型.
