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Munc-18蛋白抗体在大鼠癫痫性脑病发病机制中的作用
目的 通过研究神经突触前膜胞内蛋白(Munc-18蛋白)抗体对癫痫大鼠海马神经细胞的影响,探讨Munc-18蛋白抗体在癫痫性脑病发病机制中的作用.方法 选择10只SD大鼠,构建大鼠癫痫模型.造模成功后取脑,将海马皮质组织利用胰酶消化分离培养海马细胞,培养后的海马细胞分为Munc-18抗体干扰组和空白对照组,Munc-18抗体干扰组均滴入不同浓度(稀释×200,×400,×1 000)的Munc-18抗体与同容积的培养液,作用20 h或40h;空白对照组只加入同容积的培养液.采用酶标仪测定细胞存活率,采用乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测LDH释放量、采用脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡并计算凋亡指数,以研究Munc-18抗体对海马神经细胞的损害情况.结果 Munc-18抗体干扰(20 h或40h)组三个浓度间比较,LDH释放量、凋亡指数、细胞存活率差异均有统计学意义(P均<0.01);与空白对照组比较,Munc-18抗体干扰组作用20 h及40 h的LDH释放量、凋亡指数增加,细胞存活率减低,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 Munc-18抗体诱导神经细胞凋亡,损害神经元,可能是引发癫痫脑病的重要原因.
关键词: 癫痫性脑病 神经突触前膜胞内蛋白 海马神经细胞 乳酸脱氢酶释放 凋亡