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入骨形态发生蛋白2文献资料
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非病毒载体Lip2000介导BMP2基因转染BMSCs促进大鼠骨折愈合
目的 探讨非病毒载体LipofectamineTM2000 (Lip2000)介导入骨形态发生蛋白2(BMP2)基因体内转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)促进大鼠骨折愈合的效果.方法 20只大鼠建立股骨骨折模型,根据随机抽签原则分为观察组与对照组大鼠各10只.观察组大鼠股骨骨折断端间隙局部注射Lip2000转染BMP2:注射Lip2000后取大鼠红骨髓,将传代培养后生长旺盛的红骨髓细胞与BMP2转染试剂的混合物(聚乙烯亚胺和BMP2基因质粒的混合液)在细胞培养液中培养以转染BMSCs,转染后再植入骨折部位.对照组骨折断端注射相同体积生理盐水.观察骨折愈合情况,回滴定法测定骨密度,Western blot法检测BMP2在骨折间软组织中的相对表达水平.结果 大体标本观察发现观察组骨痂生成量多于对照组.X线显示观察组基因转染处的骨折线较对照组明显模糊.观察组大鼠的骨密度随基因转染的时间增加(转染后1周→转染后8周)而增加[(0.32-±0.09) mg/cm3vs (0.39±0.11) mg/cm3,P＜0.05],但在转染后1周[(0.32±0.09) mag/cma3vs(0.26±0.11) mg/cm3,P＜0.01]和转染后8周[(0.39±0.11) mg/cm3vs(0.22-±0.21) mg/cm3,p＜0.01]观察组的骨密度均高于对照组.Westem blot检测分析显示基因转染1周与8周后,观察组的BMP2相对表达水平均明显高于对照组.结论 Lip2000介导BMP2基因进入大鼠的BMSCs中可诱导其向成骨细胞分化,促进骨折后骨小梁形成和缩短骨折愈合时间.
