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蚊C6/36细胞文献资料
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乳酸脱氢酶与蚊虫对溴氰菊酯抗性相关性的研究
目的 研究乳酸脱氢酶(LDH)与蚊溴氰菊酯抗性之间的关系. 方法 应用RT- PCR及cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)技术扩增白纹伊蚊LDH全长基因;用实时荧光定量PCR检测敏感和抗性蚊C6/36细胞中LDH基因的表达水平;用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒检测敏感和抗性蚊细胞中LDH酶活性.结果 LDH基因全长共1831 bp,其中ORF为996 bp,共编码331个氨基酸.该基因与埃及伊蚊、黑腹果蝇、小家鼠和人的乳酸脱氢酶的同源性分别为89％、72％、66％和65％.实时荧光定量PCR结果表明,LDH基因在抗性蚊细胞中高表达,为敏感蚊细胞的1.87倍(P＜0.05).LDH酶活性检测结果显示,LDH在敏感蚊细胞中的酶活性范围为1～ 95 U/gprot,均值为40 U/gprot;在抗性蚊细胞中的酶活性范围为20 ～ 150 U/gprot,均值为75 U/gprot(n=15,P＜0.01).结论 抗性蚊细胞中的LDH表达量和酶活性均高于敏感蚊细胞,提示LDH可能与蚊溴氰菊酯抗性相关.
