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淡色库蚊溴氰菊酯抗性与性别相关性分析
目的 研究淡色库蚊抗药性与性别之间的关系.方法 建立淡色库蚊溴氰菊酯敏感、抗性两品系的杂交系,对所得子二代抗性分离群体以抗性程度区分为四组不同的表型.转录组测序后对雌雄蚊之间的抗性差异进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR进行表达量的验证.结果 子7代三组60 min击倒率分别为雌蚊:13.6％、36.4％、34.0％,雄蚊:51.1％、51.1％、82.9％;子8代两组60 min击倒率分别为雌蚊:13.0％、19.6％,雄蚊:26.4％、51.9％;子9代五组60 min击倒率分别为:雌蚊47.2％、66.7％、14.8％、38.5％、32.9％,雄蚊:68.7％、70.0％、54.8％、41.7％、58.3％,抗性击倒试验显示,杂交蚊雄蚊抗性水平低于雌蚊;定量PCR显示抗性相关基因乙酰葡萄糖胺水解酶蛋白(protein O-GlcNAcase)基因和溶血磷脂酶(lysophospholipase)基因在敏感雄蚊中高表达,而在抗性雌蚊中低表达.结论 淡色库蚊溴氰菊酯抗性与性别相关,提示淡色库蚊雌雄蚊间可能存在不同的抗性机制.
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乳酸脱氢酶与蚊虫对溴氰菊酯抗性相关性的研究
目的 研究乳酸脱氢酶(LDH)与蚊溴氰菊酯抗性之间的关系. 方法 应用RT- PCR及cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end,RACE)技术扩增白纹伊蚊LDH全长基因;用实时荧光定量PCR检测敏感和抗性蚊C6/36细胞中LDH基因的表达水平;用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒检测敏感和抗性蚊细胞中LDH酶活性.结果 LDH基因全长共1831 bp,其中ORF为996 bp,共编码331个氨基酸.该基因与埃及伊蚊、黑腹果蝇、小家鼠和人的乳酸脱氢酶的同源性分别为89％、72％、66％和65％.实时荧光定量PCR结果表明,LDH基因在抗性蚊细胞中高表达,为敏感蚊细胞的1.87倍(P＜0.05).LDH酶活性检测结果显示,LDH在敏感蚊细胞中的酶活性范围为1～ 95 U/gprot,均值为40 U/gprot;在抗性蚊细胞中的酶活性范围为20 ～ 150 U/gprot,均值为75 U/gprot(n=15,P＜0.01).结论 抗性蚊细胞中的LDH表达量和酶活性均高于敏感蚊细胞,提示LDH可能与蚊溴氰菊酯抗性相关.
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嗜人按蚊对溴氰菊酯抗性的遗传分析
目的对实验室选育的嗜人按蚊抗溴氰菊酯品系进行抗性遗传特性分析.方法采用LC-P线法研究嗜人按蚊对溴氰菊酯抗性的遗传方式.结果正交和反交F1代的抗性系数分别为15.19、16.66,接近1:1.D=0.651,F1代的LC-P线靠近抗性亲本一方.BC代在死亡率50%处与F2代死亡率在25%-75%处未出现明显平坡,BC和F2的实际死亡率和理论死亡率曲线的适合性检验差异具有显著性,P均＜0.01.结论嗜人按蚊对溴氰菊酯的抗性是由常染色体遗传所致的多基因遗传,抗性遗传表现为不完全显性.
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五株白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性生物测定和生化检测的研究
目的检测采自野外株和实验室驯化株白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性水平,探讨实验室抗性株(R-lab)的抗性机理.方法以采自深圳、广州龙洞和东莞庄的三株白纹伊蚊(SZ,LD和DW)和两株实验室驯化白纹伊蚊(S-lab和R-lab)为研究对象,采用WHO推荐的幼虫浸渍法分别测定它们的抗药性水平,并采用PBO增效实验和生化检测方法测定R-lab株代谢酶活性.结果与S-lab株相比,R-lab株抗性倍数高(RR50:480),而采自野外的三株抗性倍数较低(LD:6.6;DW:8.5;SZ:2.0).对R-lab株活体增效实验和离体解毒酶实验结果表明PBO增效作用显著,增效倍数为120倍,GST酶活性上升1.29倍,EST酶活性没有改变.结论 R-lab株和野外的三个种群对溴氰菊酯均有一定的抗性水平,以R-lab株抗性水平高;代谢抗性是R-lab株抗药性形成的主要机理之一,其中细胞色素P450单加氧酶活性升高占据主导地位.
