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二聚体蝎型荧光探针文献资料
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一种快速检测HBV基因的荧光定量PCR法的建立
目的 利用二聚体蝎型荧光探针技术,建立一种能用于临床的快捷、敏感、特异、价格低廉的HBV实时荧光定量PCR检测方法.方法 根据HBV基因组保守区域precore/core设计二聚体蝎型荧光探针和引物,构建质粒标准品,优化荧光定量PCR条件,并进行方法学评价.结果 所建方法的检测范围为101-108 copies/μl,灵敏度达到10 copies/μl,低拷贝样品的批内和日间重复性(CV)分别为1.71%和2.57%,高拷贝样品的批内和日间CV分别为3.00%和3.86%.与商品化TaqMan试剂盒相比,本法阳性检出率较高,且检测时间缩短了45 min(约减少1/3),成本降低50%.结论 成功建立了快速检测HBVDNA的二聚体蝎型荧光定量PCR方法,为研发适合临床应用的HBV基因定量检测试剂盒奠定了基础.
