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红细胞铜锌超氧化物歧化酶的连续监测法
采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统与色原偶联,研制了红细胞铜、锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)测定试剂,并在Monarch 2000 Plus自动生化分析仪上,改进SO D活性测定的连续监测法.结果显示,该法批内CV 2.5%,批间CV 4.0%,回收率9 0%~105%,平均回收率98.5%;在标准品0.25~4.00 U/ml范围内呈线性(r≥0.990) ,方法精密度和准确性均佳.同时还可应用于手工操作的固定时间法.
关键词: 铜、锌超氧化物歧化酶 连续监测法 固定时间法 -
变性高效液相色谱法在FALS突变位点检测中的应用
目的检测一个肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)家系的铜、锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn su-peroxide dismutase,SOD1)基因的突变位点,同时观察变性高效液相色谱法(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)的实用价值.方法对PCR-SSCP检测阴性的外显子,应用DHPLC法及DNA直接测序技术,再次进行SOD1基因的突变位点检测.结果经DHPLC检测,家系成员Ⅲ1SOD1基因的第4外显子有突变峰,DNA直接测序证实存在杂合子,发生了GAA→GGA错义突变,使编码的氨基酸由谷氨酸变为甘氨酸.结论DHPLC技术与PCR-SSCP相比有更高的敏感性,可作为大样本筛查突变位点的一种便捷可靠手段.
关键词: 家族性肌萎缩侧索硬化症 铜、锌超氧化物歧化酶 变性高效液相色谱法 突变