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恶性疟原虫体外药敏实验检测方法的比较研究
目的 比较WHO微量测试法(WHO microtest)、疟原虫乳酸脱氢酶(Plasmodial lactate dehydrogenase,pLDH)ELISA测定法、富组蛋白 Ⅱ(Histidine-rich protein Ⅱ,HRP Ⅱ)ELISA测定法和SYBR Green Ⅰ荧光测定法等4种恶性疟原虫体外药敏实验检测方法,确定一种较为稳定、简便快速且经济的体外药敏实验检测方法,用于后续疟原虫敏感性的监测及新型抗疟药的筛查.方法 以恶性疟原虫虫株3D7、FCC、K1、Dd2为对象,分别采用WHO microtest法、pLDH法、HRPⅡ法和SYBR Green Ⅰ法测定其对氯喹、哌喹和阿莫地喹的敏感性,并采用Friedman检验、偏相关分析、Pearson相关分析和Bland-Ahman分析对4种药敏检测方法的IC50值进行分析.结果 在初始密度为0.5%~1.0%时,4种方法的IC50值之间的差异无统计学意义(P>0.05),任意2种方法间均呈直线相关关系(P< 0.001).WHO microtest法技术要求高、耗时长且结果判定受主观影响;HRPⅡ法的敏感性高于pLDH法和SYBR Green Ⅰ法,但成本高;SYBR Green Ⅰ法技术要求低、耗时短且成本低.结论 SYBR Green Ⅰ法是一种较为便捷、经济的检测方法,适用于大规模监测疟原虫药物敏感性及研究新型抗疟药.