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布比卡因致高糖培养SH-SY5Y细胞内质网应激增强与活性氧簇增多及凋亡增加
目的 将布比卡因作用于高糖培养的SH-SY5Y细胞,观测其对细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)及细胞凋亡的影响. 方法 不同浓度葡萄糖培养基培养SH-SY5Y细胞,经1 mmol/L布比卡因作用6h.采用流式细胞仪检测细胞内ROS产量及细胞凋亡情况、MTT法检测细胞存活率、Western blot技术检测细胞内GRP78相关蛋白的变化. 结果 葡萄糖浓度为5.6、6.1、7.0 mmol/L的3组间ROS含量差异无统计学意义(P＞0.05);葡萄糖浓度为7.8、11.1、13.3 mmol/L时ROS产量分别高于5.6、6.1、7.0 mmol/L组(P＜0.05).各组细胞存活率(％)依次为(4.29±0.20)、(3.30±0.19)、(6.31±0.14)、(7.89±0.09)、(2.81±0.12、(1.01±0.11,组间差异均具有统计学意义(P＜0.05).各组细胞凋亡率(％)依次为(1.80±0.09)、(2.82±0.11)、(3.30±0.21)、(431±0.18)、(6.28±0.13)、(7.89型0.08),组间差异均具有统计学意义(P＜0.05).Grp78表达结果为5.6 mmol/L组和6.1 mmol/L组分别为(1.02±0.12)和(0.97±0.06),均高于7.0 mmol/L组(0.39±0.04);7.8 mmol/L组(0.98±0.06)高于7.0 mmol/L组(0.39±0.04);11.1 mmol/L与13.3 mmol/L组低于其他各组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);5.6 mmol/L组、6.1 mmol/L组和7.8 mmol/L组相比,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 细胞内ROS增多及细胞凋亡增加可能与布比卡因增强高糖培养的SH-SY5Y细胞内质网应激有关,引起细胞内ROS爆发,从而导致细胞损伤和凋亡;而Grp78功能减弱进一步增强细胞内质网应激.
