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上皮细胞-间充质细胞转变及其在组织纤维化中的意义
自从细胞分化理论建立以来,人们一直认为细胞分化发育的过程是受遗传机制调控的单向不可逆性过程.多能干细胞通过不对称分裂,一部分子细胞继续保持干细胞特性,而另一部分子细胞按照既定的模式分化成为具有成熟功能的组织细胞[1].
关键词： 上皮细胞-间充质细胞转变 组织纤维化 转变机制 -
结缔组织生长因子在人视网膜色素上皮细胞的增生、迁移和上皮细胞-间充质细胞转变中的作用
目的 研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的增生、迁移和上皮细胞-间充质细胞转变(epithelial mesenchymal transition,EMT)中的作用.方法 采用CCK-8细胞计数试剂盒测定400 ng·mL-1 CTGF处理后的ARPE-19细胞以及稳定表达CTGF siRNA或对照siRNA的ARPE-19细胞的增生情况.采用细胞划痕实验评估CTGF RNAi对ARPE-19细胞迁移的影响,同时测定稳定表达CTGF siRNA或对照siRNA的ARPE-19细胞中CTGF、FN、MMP-2和α-SMA的表达水平以评估CTGF对于TGFβ1诱导的EMT作用.结果 400 ng· mL-1CTGF处理组APRE-19细胞与未接受CTGF处理组细胞之间以及CTGF siRNA处理组与阴性对照siRNA组之间的细胞倍增时间均存在显著差异(均为P＜0.05).正常培养ARPE-19细胞组修复划痕的时间(≤48 h)显著少于CTGF RNAi靶向干扰处理组(≥72 h).以TGF-β1诱导EMT,CTGF siRNA处理组与阴性对照组比较,CTGF、α-SMA、FN和MMP-2表达均显著下调.此外,外源性CTGF可单独诱导ARPE-19细胞α-SMA表达增加.结论 CTGF能够促进ARPE-19细胞增生,而CTGF RNAi不但能够显著抑制其增生还可显著抑制由划痕实验引发的ARPE-19细胞的迁移.此外,CTGF可通过上调α-SMA表达水平而增强ARPE-19细胞对于TGF-β1的反应,CTGF RNAi可使TGF-β1诱导的EMT减弱.
