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  • 组织切片肾小球微分离技术在肾脏病研究中的应用

    作者:龚如军;刘志红;胡可斌;李颖健;王建平;黎磊石

    目的:建立组织切片肾小球微分离技术,并将其应用于肾脏病分子病因学的研究.方法:选取肾脏病患者的肾活检组织石蜡切片.选取结构正常的肾小球、节段硬化肾小球和球性硬化肾小球分别进行肾小球微分离.一步法提取微分离肾小球DNA.PCR-微型凝胶电泳检验DNA质量.质量合格DNA应用于高保真PCR扩增TGF-βⅡ型受体基因片段和聚丙烯酰胺凝胶电泳.结果:在成功获取肾小球丝球体的同时,相邻组织肾小囊壁保留完好;微分离小球一步法提取的DNA合格率87.5%;各样本经高保真PCR扩增后,杂带少,目的条带清晰.密度随肾小球硬化程度递减.结论:本研究利用常规肾活检组织石蜡切片建立了肾小球微分离技术,进而用微分离肾小球提取DNA成功地进行了DNA扩增,并将其应用于肾脏病分子病因学的研究.

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