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实验性精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸、附睾精子结合抗原11mRNA及其蛋白异构体表达的影响
目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸和附睾中精子结合抗原11(SPAG11)mRNA及其蛋白异构体SPAG11E表达的影响,并探讨其与精索静脉曲张导致男性不育的关系.方法:40只SD大鼠随机分为ELV 2周组、4周组,假手术对照2周组、4周组,每组10只.ELV组行部分结扎左肾静脉建立青春期SD大鼠ELV模型,假手术对照组仅显露左肾静脉过程,但不结扎.应用RT-PCR和免疫组化法(n＝5)检测SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV2周组和ELV4周组及各自对照组大鼠双侧睾丸、附睾中的表达变化.结果:RT-PCR结果显示,SPAG11基因376 bp的特异扩增产物仅见于大鼠附睾组织中.免疫组化结果显示,SPAG11E蛋白主要与睾丸生精上皮的圆形和长形精子细胞的顶体泡和顶体、睾丸问质细胞的胞质相结合;在附睾管上皮主细胞胞质和顶部静纤毛中表达.对RT-PCR的相对吸光度值和免疫组化的灰度值进行统计学分析显示:①左侧附睾ELV2周和4周组SPAG11 mRNA和SPAG11E蛋白的表达与各自右侧组及各自对照组比较均有显著减弱(P＜0.05或P＜0.01);左侧附睾ELV 4周组SPAG11 mRNA与SPAG11E的表达较ELV2周组显著减少(P＜0.05或P＜0.01);右侧附睾ELV4周组SPAG11E的表达也较ELV2周组显著减少(P＜0.01);②两实验组双侧睾丸SPAG11E蛋白的表达与相应对照组比较均未见明显差异(P＞0.05),且在ELV2周组和ELV4周组之间该蛋白的表达也无显著性差异(P＞0.05).结论:SPAG11是特异表达于附睾的基因,在大鼠睾丸和附睾中均可见其蛋白异构体SPAG11E免疫阳性反应,其定位及表达水平具有细胞特异性和区域特异性,而且SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV模型鼠附睾中的表达发生了明显变化,这提示SPAG11不仅可能在大鼠精子发生、成熟过程中发挥重要作用,还可能与精索静脉曲张所致的男性小育相关.
关键词： 实验性左侧精索静脉曲张 精子结合抗原11 精子结合抗原11蛋白异构体 睾丸 附睾 大鼠
