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实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸和附睾中血管内皮生长因子及其受体1表达的影响
目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸、附睾中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸激酶(Flt-1)蛋白表达的影响. 方法:建立青春期雄性SD大鼠ELV模型,采用免疫组化SP法检测VEGF和Fit-1在ELV组及假手术对照组睾丸、附睾组织中的表达变化. 结果:VEGF和Flt-1蛋白在ELV组和对照组大鼠睾丸、附睾中均有表达,其定位和表达量具有细胞特异性和区域特异性.经图像分析和统计检测显示,ELV2周和4周组双侧睾丸和附睾中VEGF蛋白的表达与相应对照组比较均显著增加(P<0.01和P<0.05);ELV2周组双侧睾丸和附睾巾Flt-1蛋白的表达与相应对照组比较也显著增加(P<0.01和P<0.01),但4周时在双侧睾丸和左侧附睾中Flt-1蛋白的表达显著下降(P<0.01和P<0.05),而右侧附睾末见明显差异(P>0.05).结论:实验性精索静脉曲张町造成青春期人鼠睾丸、附睾巾VEGF和Flt-1的表达量变化,该变化可能会影响精子的发生和成熟,因而可能是VC引起男性生育力下降甚至不育的原因之一.
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实验性精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸、附睾精子结合抗原11mRNA及其蛋白异构体表达的影响
目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸和附睾中精子结合抗原11(SPAG11)mRNA及其蛋白异构体SPAG11E表达的影响,并探讨其与精索静脉曲张导致男性不育的关系.方法:40只SD大鼠随机分为ELV 2周组、4周组,假手术对照2周组、4周组,每组10只.ELV组行部分结扎左肾静脉建立青春期SD大鼠ELV模型,假手术对照组仅显露左肾静脉过程,但不结扎.应用RT-PCR和免疫组化法(n＝5)检测SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV2周组和ELV4周组及各自对照组大鼠双侧睾丸、附睾中的表达变化.结果:RT-PCR结果显示,SPAG11基因376 bp的特异扩增产物仅见于大鼠附睾组织中.免疫组化结果显示,SPAG11E蛋白主要与睾丸生精上皮的圆形和长形精子细胞的顶体泡和顶体、睾丸问质细胞的胞质相结合;在附睾管上皮主细胞胞质和顶部静纤毛中表达.对RT-PCR的相对吸光度值和免疫组化的灰度值进行统计学分析显示:①左侧附睾ELV2周和4周组SPAG11 mRNA和SPAG11E蛋白的表达与各自右侧组及各自对照组比较均有显著减弱(P＜0.05或P＜0.01);左侧附睾ELV 4周组SPAG11 mRNA与SPAG11E的表达较ELV2周组显著减少(P＜0.05或P＜0.01);右侧附睾ELV4周组SPAG11E的表达也较ELV2周组显著减少(P＜0.01);②两实验组双侧睾丸SPAG11E蛋白的表达与相应对照组比较均未见明显差异(P＞0.05),且在ELV2周组和ELV4周组之间该蛋白的表达也无显著性差异(P＞0.05).结论:SPAG11是特异表达于附睾的基因,在大鼠睾丸和附睾中均可见其蛋白异构体SPAG11E免疫阳性反应,其定位及表达水平具有细胞特异性和区域特异性,而且SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV模型鼠附睾中的表达发生了明显变化,这提示SPAG11不仅可能在大鼠精子发生、成熟过程中发挥重要作用,还可能与精索静脉曲张所致的男性小育相关.
关键词： 实验性左侧精索静脉曲张 精子结合抗原11 精子结合抗原11蛋白异构体 睾丸 附睾 大鼠 -
实验性精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸、附睾中CRES蛋白表达的影响
目的:研究青春期大鼠实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对睾丸和附睾中胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生(CRES)蛋白表达的影响,探索精索静脉曲张导致不育的机制.方法:建立青春期雄性SD大鼠ELV模型,采用免疫组化及蛋白印迹方法检测CRES蛋白在ELV 2周组(n=8)、4周组(n=8)及其相应的对照组(n均=5)大鼠睾丸和附睾头、体、尾中的表达变化.结果:免疫组化显示,CRES蛋白在ELV实验组和对照组大鼠睾丸和附睾中均有表达.在睾丸中,CRES蛋白主要定位于圆形和长形精子细胞的胞质、精子的顶体以及残余体中,其表达与生精周期密切相关,Ⅰ～Ⅲ和Ⅸ～ⅩⅣ期表达强,Ⅶ～Ⅷ期表达次之,Ⅳ～Ⅵ期表达减弱.在附睾中,CRES蛋白主要表达于从附睾起始段到尾部的上皮主细胞的胞质中,且以体、尾部表达强,头部次之,管腔分泌物也呈阳性表达.实验组比对照组CRES蛋白表达增强.Western印迹显示:实验组和对照组大鼠睾丸和附睾在相对分子质量(Mr)为19 000和14 000处均可见CRES蛋白条带,其中以Mr19 000处表达更为明显.实验组CRES蛋白的表达比对照组明显增强.对免疫组化和Western印迹结果进行灰度值和积分吸光度值(M)测定,并经统计学分析显示:ELV 2周组和4周组比其相对应的对照组表达增强且差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01),而ELV各组间未见CRES蛋白表达有明显差异(P＞0.05).结论:CRES蛋白在大鼠睾丸和附睾中均有表达,睾丸中表达呈现生精周期特异性和细胞特异性,附睾中表达呈现附睾上皮区段和细胞特异性;CRES蛋白在青春期ELV大鼠睾丸和附睾中的表达比对照组明显增强.这些结果提示CRES蛋白在精子发生和精子成熟过程中可能起着重要的作用,并且可能与ELV引起的不育或生育力低下有关.
关键词： 胱蛋白酶抑制剂相关的附睾精子发生蛋白 实验性左侧精索静脉曲张 睾丸 附睾 大鼠 青春期 -
青春期大鼠左侧精索静脉的解剖变异及其在实验性左侧精索静脉曲张模型中的运用
目的:探索青春期大鼠左侧精索静脉(LSV)解剖变异对诱导实验性左侧精索静脉曲张(ELV)的影响. 方法:将30只雄性青春期SD大鼠随机分成3组,每组10只.A组缩窄左肾静脉并结扎LSV侧支,B组仅缩窄左肾静脉,C组为假手术组.观察LSV走行,测量其直径.术后30 d分析左肾大体和组织学变化,并再次测量LSV直径. 结果:大鼠LSV 90％存在不规律出现的侧支,仅10％无侧支.术后各组左肾未见异常.A、B、C组LSV直径术前和术后分别为(0.16±0.08) mm和(1.47 ±0.15) mm、(0.15 ±0.07) mm和(0.31±0.49) mm、(0.16±0.06) mm和(0.17 ±0.07) mm.A组术后直径较术前明显增粗(P＜0.01),B组和C组均无统计学差异(P均＞0.05).术后LSV直径A组明显大于B组(P＜0.01).A组ELV诱导成功率为100％,B组为10％(仅1只LSV无侧支的大鼠造模成功),C组未见曲张. 结论:认清LSV解剖回流,并结扎其不规律出现的侧支是建立稳定一致的ELV模型的关键.
关键词： 解剖 实验性左侧精索静脉曲张 左侧精索静脉 青春期大鼠 -
实验性左侧精索静脉曲张对青春期大鼠附睾中VEGF、VEGFR2蛋白表达的影响
目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(VEGFR2)在实验性左侧精索静脉曲张(ELV)大鼠附睾中的表达和定位,探讨VEGF、VEGFR2在精索静脉曲张(VC)致男性不育中的作用.方法 通过部分结扎左肾静脉建立大鼠ELV模型,于术后2周和4周取材,采用免疫组化法检测VEGF、VEGFR2在附睾中的表达变化.结果 ELV大鼠两侧附睾中VEGF蛋白表达均上调,但ELV 4周组表达明显少于2周组;ELV 2周组大鼠附睾中VEGFR2蛋白的表达比对照组有所增加,而ELV4周组相比对照组和ELV 2周组均显著下降.结论 ELV对VEGF、VEGFR2蛋白的表达有影响,说明VC所致男性不育可能与VEGF及VEGFR2的表达变化有关.
关键词： 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体2 实验性左侧精索静脉曲张 不育 附睾 免疫组化 大鼠
