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微小RNA-144-3p靶向调控TPD52表达及对喉癌细胞凋亡和侵袭的影响
目的 探讨微小RNA-144-3p(miR-144-3p)对喉癌细胞凋亡、侵袭的影响和肿瘤蛋白D52(TPD52)的靶向调控作用.方法 采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测23对手术切除的喉癌组织和癌旁组织及人鼻咽永生化上皮细胞NP69和喉癌细胞株(Hep2、TU212和TU686)的miR-144-3p水平.选取miR-144-3p水平低的喉癌细胞并向其转染miR-144-3p模拟物(过表达组)或阴性对照(对照组),转染48 h后采用QPCR检测两组的miR-144-3p和TPD52 mRNA水平,采用MTT法、流式细胞术和Transwell小室实验检测增殖率、凋亡率和穿膜细胞数;采用双荧光素酶报告实验评价miR-144-3p对TPD52的靶向调控作用.结果 QPCR检测结果显示,喉癌组织中miR-144-3p的水平为0.241±0.156,低于癌旁组织的1.003±0.229(P＜0.05);喉癌细胞Hep2、TU212和TU686的miR-144-3p水平依次为0.123±0.027、0.356±0.069和0.541 ±0.087,均低于NP69细胞(P＜0.05),选取表达水平低的Hep2细胞用于后续实验.转染48 h,过表达组miR-144-3p的水平为3.266±0.820,高于对照组的1.051±0.144(P＜0.05).过表达组转染24、48、72 h的细胞增殖率均低于对照组(P＜0.05).转染48 h过表达组的细胞凋亡率为(16.980±1.983)％,高于对照组的(6.732±0.943)％,差异有统计学意义(P＜0.05).过表达组的穿膜细胞数为(62.7±8.0)个,低于对照组的(87.7±8.9)个,差异有统计学意义(P＜0.05).双荧光素酶活性检测结果显示,miR-144-3p可抑制野生型TPD523'UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型TPD523'UTR的荧光素酶活性无影响.结论 miR-144-3p在喉癌组织和喉癌细胞株中均低表达.miR-144-3p可能通过抑制TPD52表达来抑制喉癌细胞的增殖、侵袭并诱导凋亡.
