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MageD1在口腔鳞癌中的表达及其促进凋亡作用的研究
目的：检测口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞系中黑色素瘤相关抗原D1（ MageD1）的表达，并在口腔鳞癌细胞系HN6中通过转染慢病毒的方法过表达MageD1，探讨其对细胞凋亡的影响。方法：收集临床标本，通过Western blot和RT?PCR的方法检测口腔鳞癌以及HN6细胞系中MageD1的表达量，用载有MageD1的慢病毒转染HN6细胞，检测转染效果和Bax、Cleaved?Casepase3等凋亡相关蛋白的表达，并采用裸鼠荷瘤实验研究肿瘤体内生长的情况。结果：MageD1在口腔鳞癌组织及HN6细胞株中较正常组织呈低表达，Western blot及RT?PCR结果表明，MageD1成功转染并得到稳定过表达MageD1的Lv?Maged1细胞，并且过表达MageD1的HN6细胞中Cleaved?Casepase3和Bax的表达量高于HN6细胞，荷瘤实验证明MageD1具有抑制肿瘤生长作用（ P＜0．05）。结论：MageD1在口腔鳞癌组织及细胞系中表达降低，过表达MageD1能促进肿瘤细胞凋亡。
关键词： 口腔鳞癌 黑色素瘤相关抗原D1 凋亡 -
MAGE-D1对大鼠牙胚来源外胚间充质干细胞增殖迁移能力的影响
目的 研究黑色素瘤相关抗原D1(Melanoma associated antigens,MAGE-D1)对大鼠牙胚来源的外胚间充质干细胞(Ectomensenchymal stem cells,EMSCs)增殖及迁移能力的影响.方法 取SD大鼠孕19.5 d胎鼠牙胚组织,组织块法培养牙胚来源外胚间充质干细胞,流式细胞仪进行外胚间充质干细胞表面分子鉴定CD14、CD29、CD44、CD45、CD90、CD105、CD146、CD166和p75NTR,MAGE-D1 siRNA转染入外胚间充质干细胞,实验组分为:对照组(Control)和MAGE-D1 siRNA组(MAGEsiRNA-EMSCs),CCK8法和划痕法分别检测两组细胞增殖能力与迁移能力,Real Time-PCR及Western blot检测迁移及WNT通路相关基因MAGE-D1、β-catenin、E-cadherin的mRNA及蛋白表达量.结果 组织块法成功培养出牙胚来源的外胚间充质干细胞,经流式细胞仪检测细胞阳性表达CD14 (92.16％)、CD29 (94.53％)、CD44 (99.51％)、CD90(95.18％)、CD105 (34.22％)、CD146(92.39％)、CD166(98.15％)和p75NTR(88.56％),阴性表达CD45 (0.5％);CCK8法检测MAGE-D1 siRNA组EMSCs增殖能力受到抑制;划痕试验法检测MAGE-D1 siRNA组细胞48 h迁移量高于对照组细胞;Real Time-PCR检测Mage-D1、β-catenin和E-cadherin表达量,MAGE-D1 siRNA组EMSCs MAGE-D1和E-cadherin表达较对照组低,而β-catenin表达较高,Western blot检测MAGE-D1、β-catenin和E-cadherin表达水平趋势与Real Time-PCR结果相一致.结论 抑制EMSCs中MAGE-D1的表达上调β-catenin,下调E-cadherin,能够提高细胞的迁移能力,但是其导致增殖能力降低,MAGE-D1可能作为EMSCs迁移增殖能力的关键因子.
关键词： 黑色素瘤相关抗原D1 外胚间充质干细胞 增殖 迁移 Wnt信号通路
