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遗传性牙本质发育不全Ⅱ型DSPP基因新突变
目的分析我国遗传性牙本质发育不全Ⅱ型(dentinogenesis imperfecta typeⅡ,DGI-Ⅱ)患者DSPP基因突变特征,从分子水平探讨DGI-Ⅱ的发病机制.方法抽提2个汉族遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系患者外周静脉血基因组DNA,应用聚合酶链反应及DNA测序技术,结合序列分析方法,对2个家系共13名家庭成员的DSPP基因1～4号外显子及其邻近序列进行突变分析.结果家系A中的患者在DSPP的第4外显子发生Asn164Tyr突变;家系B的患者在DSPP第4外显子发生Cys159Trp突变.结论这两个突变系是国内外尚未报道的新突变.
关键词： 遗传性牙本质发育不全Ⅱ型 DSPP基因 突变 -
遗传性乳光牙本质家系致病基因突变的鉴定
目的 对一个遗传性乳光牙本质(dentinogenesis imperfecta shields typeⅡ,DGI-Ⅱ)家系进行DSPP基因的突变分析.方法 采集家系成员外周血或胎儿绒毛组织,用酚氯仿法提取基因组DNA.应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)-Sanger测序方法鉴定先证者DSPP基因第2～5外显子及外显子/内含子衔接区序列,并进行突变分析;针对突变位点设计错配引物引入AluⅠ酶切位点,通过限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳方法在该家系正常人及60名无关正常个体中进行致病突变验证;构建含微型DSPP基因的pcDNA3.1基因表达载体,在体外培养细胞中验证突变致病性.结果 该家系3例患者和一名胎儿均携带DSPP基因内c.52-1G＞A的杂合突变,突变造成该基因第3外显子5 '端剪接点变异;60名对照者和家系正常个体均未携带该突变;微小基因(Minigene)体外表达显示c.52-1G＞A导致DSPP基因转录产物第3外显子的跳跃剪接.结论 本研究在一个DGI-Ⅱ家系中发现了DSPP基因内一个新的致病剪接突变(c.52-1G＞A),并在此基础上为先证者提供了产前基因诊断.
