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载体pTWIN1文献资料
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人β-防御素DEFB113的重组表达及活性鉴定
DEFB113为人β-防御素家族新成员,其生物学功能尚不清楚.为了探索一种可以较低成本和较高产量表达活性DEFB113多肽的方法,将编码DEFB113成熟肽的序列克隆到载体pTWIN1上,并转化至E.coliBL21 (DE3)中进行表达.结果表明融合蛋白主要以可溶形式存在；重组载体中融合标签的几丁质结合域(CBD)和内含肽(intein)分别使亲和层析纯化和融合标签自剪切一步完成.终得到DEFB113多肽的产率为6～7 mg/LLB.经活性鉴定,该重组DEFB113多肽对于S.aureus,E.coli K12D31和C.albicans均表现出较强的抑制作用；另外DEFB113无明显的溶血活性,是一种较理想的多肽抗生素.该研究为进一步研究DEFB113的生理功能以及其它人β-防御素结构与功能奠定了基础.
关键词： 原核表达 载体pTWIN1 人β-防御素DEFB113 抑菌活性 溶血活性
