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胸腺融合肽文献资料
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胸腺素α1-胸腺五肽在大肠杆菌中的表达及表达条件优化
目的:探讨胸腺素α1-胸腺五肽(Tα1-TP5)在大肠杆茵中的表达及表达条件优化.方法:将化学合成的Tα1-TP5基因与原核表达栽体pGEX-4T-1融合并转化至E.coli BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统研究培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度及诱导时间等条件对融合蛋白表达量的影响.融合蛋白经GST琼脂糖珠亲和色谱纯化及重组肠激酶切割后,电喷雾质谱鉴定Tα1-TP5.结果:选用TB培养基,在菌体对数生长中后期加入终浓度为0.05mmol/L的IPTG,37℃诱导5h,GST融合蛋白的表达量高,占菌体总蛋白的35.8%,且主要以可溶形式表迭.Tα1-TP5的分子质量与理论值相似.结论:Tα1-TP5成功在E.coli中表达,并确定了佳表达务件.
关键词： 胸腺素α1-胸腺五肽 胸腺融合肽 GST融合蛋白 大肠杆菌 表达条件
