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  • 高效亲和色谱法检测细胞培养上清中的抗体融合蛋白质

    作者:唐治华;应跃斌;黄敏芬;罗家立;陈枢青

    目的 建立高效亲和色谱检测抗体融合蛋白质的方法,用于抗体及抗体融合蛋白质生产的过程控制.方法 正压匀浆法装填rProtejn A Sepharose,用不同pH值缓冲液分步洗脱.结果 在25~1 000 μg/mL浓度范围内,重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)浓度和峰面积显著相关,r=0.999 6;回收率范围为91%~99%,对表达TNFR-Fc的CHO工程细胞的不同培养阶段的3份上清分别进行3次重复测定,RSD在2%以内.结论 该方法适用于抗体及抗体融合蛋白质生产的过程控制.

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