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低氧环境下转染血管内皮生长因子165对人胃癌细胞体外侵袭转移的影响
目的:探讨低氧环境下血管内皮生长因子165(VEGF-165)对人胃癌细胞侵袭转移的影响及可能的机制.方法:实验分为4组:以利用腺病毒作为载体并已构建成功含VEGF-165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF-165)进行瞬时转染,同时用低氧诱导剂氯化钴进行低氧干预的人胃癌细胞株BGC-823为低氧转染(D)组;单纯用低氧诱导剂氯化钴进行低氧干预的人胃癌细胞株BGC-823为单纯低氧干预(B)组;以利用腺病毒作为载体并已构建成功含VEGF-165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF-165)进行瞬时转染的人胃癌细胞株BGC-823为单纯转染(C)组;以未转染未行低氧干预的正常细胞作为空白对照(A)组.应用Transwell小室分析低氧环境下VEGF165转染前后胃癌细胞迁移能力的变化;利用半定量RT-PCR方法对4组细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、基质金属蛋白质酶2(MMP-2)的mRNA表达水平进行分析.结果:D组胃癌细胞的侵袭能力及uPA、MMP-2的mRNA表达明显高于A、B、C组(P<0.05).结论:低氧环境和VEGF-165因子共同作用能够明显提高人胃癌细胞BGC-823的侵袭能力及细胞中uPA、MMP-2的mRNA的表达,表明低氧环境下VEGF-165促进肿瘤细胞的侵袭转移.
关键词： 胃癌 血管内皮生长因子165 侵袭能力 尿激酶型纤溶酶原激活物 基质金属蛋白质酶2 氯化钴 -
血管生成素1基因转染对胃癌细胞侵袭能力的影响
目的 探讨人血管生成素1(Ang-1)对人胃癌细胞BGC-823基质会属蛋白酶2(MMP-2)表达情况的影响.方法 利用腺病毒作为载体将已构建成功的含Ang-1基因的重组腺病毒(Ad-Ang-1)瞬时转染人胃癌细胞BGC-823为实验组,转染编码绿色荧光蛋白的复制缺陷型腺病毒重组体(Ad-GFP)为阴性对照组,未转染的正常细胞为对照组.应用RT-PCR和Western blot印迹检测三组细胞中MMP-2在mRNA和蛋白表达的情况.结果 MMP-2在实验组中表达明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05).结论 Ang-1能显著提高人胃癌细胞BGC-823的MMP-2的表达,提示Ang-1可能具有促进肿瘤细胞侵袭的作用.
