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pALEX质粒文献资料
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牛生长抑素基因的构建及其在大肠杆菌中的表达
目的:在大肠杆菌中克隆表达牛生长抑素基因并初步纯化.方法:根据牛生长抑素基因序列,按照大肠杆菌偏爱密码子设计合成2个DNA片段,经退火、Klenow酶补平及连接反应,获得牛生长抑素基因片段;经PCR扩增、EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,牛生长抑素基因被克隆在表达质粒pALEX中.结果:将重组质粒转化BL21(DE3),经IPTG诱导获得表达.表达产物经超声破碎和GST-Sepharose 4B亲和层析纯化获得重组蛋白.结论:牛生长抑素基因得到了高水平表达并初步纯化,为表达产物的大量制备、进一步的结构功能关系及在畜牧业生产上的应用研究奠定了基础.
