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野生型p53cDNA文献资料
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含野生型p53cDNA重组逆转录病毒的制备
目的:制备含野生型p53cDNA重组体的复制缺陷型逆转录病毒.方法:设计引物PCR扩增野生型p53cDNA,用T-A克隆的方法克隆入质粒载体pGEM-T,转化JM109,提取pGEM-T/p53重组体,双酶切得到野生型p53cDNA,然后再克隆入逆转录病毒表达载体pLXSN,转化感受态大肠杆菌JM109,筛选pL(p53cDNA)SN重组体,脂质体法转染包装细胞AM12,G-418(geneticin)筛选,收集病毒液.结果:通过PCR和重组质粒酶切筛选出重组阳性克隆,收集含pL(p53cDNA)SN重组体的逆转录病毒.结论:含pL(p53cDNA)SN重组体的复制缺陷逆转录病毒可用于转染真核细胞等进一步研究.
关键词： 野生型p53cDNA 逆转录病毒表达载体 -
野生型p53cDNA真核表达载体的构建
p53基因是癌症研究和肿瘤基因治疗中引人注目的抑癌基因之一,据报道,大约一半左右癌症的起因是由于p53基因突变.在所有的抑癌基因中,p53基因是突变率极高的一种,它的失活会阻止细胞进入凋亡,从而使之处于持续分裂状态而增加突变及恶性转化的概率[1].因此,研究野生型p53基因在肿瘤的基因治疗中有普遍性意义.
关键词： 野生型p53cDNA 真核表达载体 基因突变
