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HIV-1'Tat文献资料
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HIV-1 Tat对KSHV感染SK-N-SH细胞的影响
目的:初步探索人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)反式激活蛋白(Tat)对卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染人神经母细胞瘤细胞系SK-N-sH细胞(SK细胞)的影响.方法:将原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-I细胞与SK细胞共培养.观察SK细胞的细胞病变效应(CPE)并采用Real-time PCR检测KSHV在SK细胞中的复制.重组质粒Tat+pcDNA3.1(+)和空载体pcDNA3.1(+)分别转染SK细胞,经G418筛选获得抗性克隆,以RT-PCR和Western blot检测Tat基因的表达.通过BCBL-1细胞与SK-Tat/SK-vector细胞共培养,采用Real-time PCR检测SK-Tat/SK-vector细胞中KSHV裂解期基因ORF50和26的mRNA表达.结果:细胞共培养后,SK细胞出现CPE且SK细胞中检测到KSHV的基因.RT-PCR和Western blot均在Tat预期位置检测到特异性条带.Real-time PCR检测显示Tat降低KSHV ORF50和26 mRNA转录水平.结论:初步探索表明,在细胞共培养过程中Tat蛋白抑制KSHV在SK细胞中的复制.
关键词： 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 HIV-1'Tat 共培养
