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脱氧鬼臼毒素对3龄菜青虫头部AChE、ATPase活性的影响
目的:研究脱氧鬼臼毒素(DOP)对3龄菜青虫的毒杀作用及中枢神经系统AChE、ATPase活性的影响,探讨其杀虫机制.方法:采用小叶碟添加法,测定DOP对3龄菜青虫的毒杀活性,建立染毒模型,用试剂盒测定AChE和ATPase活性.结果:①DOP对3龄菜青虫的毒杀活性表现出浓度、时间依赖性,48 h LC50=151.87 mg/L＞72 h LC50=39.99 mg/L＞96 h LC50=10.60mg/L.②DOP对AChE活性没有明显影响.③高浓度(125 mg/L)组对ATPase活性持续抑制,中浓度(5、25 mg/L)组在24 h时激活,48 h时恢复正常,72 h时保持正常(5 mg/L)或抑制作用(25 mg/L).结论:DOP对3龄菜青虫具有毒杀作用;3龄菜青虫中枢神经系统AChE不是DOP靶标.ATPase可能是DOP的重要靶标之一.
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脱氧鬼臼毒素对大鼠背根神经元电压依赖性钾通道的作用
目的:探讨脱氧鬼臼毒素(DOP)对外周神经系统的毒性作用机制.方法:采用全细胞膜片钳技术研究DOP对急性分离大鼠背根(DRC)神经元电压依赖性钾通道的作用,从离子通道水平探讨其神经毒性作用机制.结果:10、20、40、80 μmol/L的DOP对全钾电流(Ik)和延迟整流钾电流(IKDR)均有影响,且能以浓度依赖方式、部分可逆地阻断电压依赖性钾电流,使电流电压曲线向去极化方向移动.同时,DOP对IKDR的抑制率[(43.22±6.85)％]明显高于IK[(27.55±4.65)％].结论:DOP对钾离子电流的影响可能是鬼臼毒素类化合物引起外周神经病变的机制之一.
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脱氧鬼臼毒素对大鼠背根神经节神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系
目的:研究脱氧鬼臼毒素对大鼠背根神经节神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系.方法:分别用终浓度为1、5、25、125 μmol/L的脱氧鬼臼毒素作用于荧光染料DiBAC4(3)标记的大鼠背根神经节神经元,在激光共聚焦显微镜上监测神经元膜电位的实时动态变化,并观察钠通道阻断剂TTX(tetrodotoxin)对脱氧鬼臼毒素膜电位效应的影响.结果:加入脱氧鬼臼毒素后大鼠背根神经节神经元膜电位呈去极化改变,5 min后达到大水平,8 min内趋于稳定.1、5、25、125 μmoL/L的脱氧鬼臼毒素作用5 min后,所测得的荧光强度值分别为62.3±2.1、63.8±3.6、68.5±3.8、88.1±5.4,和空白对照组相比差异均有显著性(P<0.01).1 μmoL/L TTX与大鼠背根神经节神经元共孵育20 min后再加入25 μmol/ml脱氧鬼臼毒素所测值为57.5±2.3,与对照组相比无显著差异(P>0.05),说明脱氧鬼臼毒素的膜电位效应可被TTX完全抑制.结论:脱氧鬼臼毒素可引起大鼠背根神经节神经元膜电位去极化,且其效应在1～125 μmol/L范围内随浓度增加而增大,钠通道可能参与了这一过程.
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八角莲的HPLC检验
八角莲(May Apple)又名独角莲、鬼臼和八角金盘等,为小檗科植物.八角莲的根及根茎含抗癌成分鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素,具有化痰散结、祛瘀止痛和清热解毒等作用,可用于治疗毒蛇咬伤、肝癌等,方法是煎水服或捣烂外敷.我国民间用其治疗邪虐、蛇毒、肿痛和咳嗽化痰,国外也有用其有效成分E-toposid(Vp-16)治疗癌症的报道[1,2].
