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117 国外有机磷农药神经发育毒性研究
有机磷农药目前占我国农药使用量的80%以上,长期低水平暴露对婴幼儿神经系统发育的影响不容忽视.有机磷农药毒作用机制研究甚多,众多研究表明,乙酰胆碱酯酶除水解乙酰胆碱外,还可能作为一种可分泌到胞外调控细胞增殖与轴突生长的神经营养因子,在神经系统发育的关键时期影响神经细胞的生长、分化和脑的正常功能.本文就近年来国外有机磷农药神经发育毒性研究概况及进展作一综述.
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剂量相加模型研究毒死蜱和乐果的联合作用
目的 探讨一定剂量范围下,毒死蜱和乐果联合毒性作用的类型和性质,为有机磷农药累积风险评估提供科学依据.方法 198只清洁级成年雌性SD大鼠,按体重随机分成22组,每组9只,即对照组(0mg/kg),毒死蜱组(2、10、18、26、34、42和50 mg/kg),乐果组(5、17、29、41、53、65和77 mg/kg)和混合组(6、15、24、33、42、51和60 mg/kg),经口一次性灌胃染毒,染毒6h后处死动物.测量大鼠大脑皮质和血清中乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.结果 毒死蜱组血清中AChE活性均低于对照组(33.596±18.011)U/ml (P＜0.05);乐果组除低剂量组5和17 mg/kg,其他组血清中AChE活性均低于对照组(P＜0.05)；混合组血清中AChE活性均低于对照组(P＜0.05).毒死蜱组皮质中AChE活性低于对照组(37.812±10.706) U/ml (P ＜0.05)；乐果组除低剂量组5 mg/kg,其他组皮质中AChE活性均低于对照组(P＜0.05)；混合组除低剂量组6和15 mg/kg组,其他组皮质中AChE活性低于对照组(P＜0.05).使用doseResp函数拟合毒死蜱、乐果和混合农药剂量-反应关系曲线,并用剂量相加模型预测混合农药剂量-反应关系曲线,在低剂量时2种农药呈现协同作用,在高剂量时表现为相加作用.结论 doseResp函数模拟毒死蜱及乐果的混合农药,在低剂量时呈现协同作用,高剂量呈现相加作用.
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健脾理气法调节实验性FD大鼠神经递质表达的研究
目的:观察健脾理气法对功能性消化不良(FD)大鼠胃肠组织神经递质表达的影响,探讨该法治疗FD的作用机制.方法:采用大鼠胃电节律失常模型,随机分为4组,应用免疫组织化学方法分别检测胃窦及十二指肠组织乙酰胆碱酯酶(AchE)、一氧化氮合酶(NOS)的表达水平.结果:FD大鼠胃窦及十二指肠组织AchE及NOS的表达较正常对照组明显减少(P＜0.01).枳术饮可显著增加胃窦及十二指肠组织AchE、NOS的阳性表达(P＜0.05-0.01).结论:健脾理气法治疗FD的作用机制可能在于调节胃窦及十二指肠神经递质Ach、NO的表达水平.
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填精补脑方对老年痴呆大鼠行为学及海马胆碱能神经递质的影响
目的：观察填精补脑方对老年痴呆大鼠行为学及海马胆碱能神经递质的影响。方法健康成年SD大鼠随机分为对照组、模型组、脑复康组、填精补脑方组，每组10只。双侧海马注射Aβ25－35构建老年痴呆大鼠模型，各组给予相应药物灌胃治疗20 d。用药结束后，测定大鼠的学习记忆能力及海马ChAT、AChE的酶学活性。结果与模型组相比，用药组达标所需训练次数、错误反应次数明显减少（ P＜0．01）；ChAT活性升高，AChE活性降低（ P＜0．01）。结论填精补脑方可以改善老年痴呆模型大鼠学习记忆功能，其机制可能与改善海马中胆碱能神经递质的代谢有关。
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嗅三针对老年痴呆大鼠学习记忆功能及海马胆碱乙酰化酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响
目的:探讨嗅三针对老年痴呆大鼠学习记忆功能影响的作用机制.方法:成年SD雄性大鼠随机分为正常对照组、阿尔茨海默病(AD,又称老年痴呆)模型组、嗅球损毁电针组、单纯AD电针组,每组10只.Aβ1-40注射法造大鼠AD模型,电凝法损毁嗅球.嗅三针为两侧"迎香"穴及"印堂"穴,电针10 min,每日1次,5次为1个疗程,共进行8个疗程.Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,比色法检测大鼠海马区胆破乙酰化酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.结果:定位航行试验显示,平均逃避潜伏期比较,AD模型组明显长于正常对照组(P＜0.01),单纯AD电针组明显短于AD模型组和嗅球损毁电针组(P＜0.01),嗅球损毁电针组与AD模型组之差异无统计学意义(P＞0.05).空间探索试验显示,原平台象限跨越相应平台的次数比较,AD模型组明显少于正常对照组(P＜0.01),单纯AD电针组明显多于AD模型组和嗅球损毁电针组(P＜0.01),AD模型组与嗅球损毁电针组之差异无统计学意义(P＞0.05).海马ChAT、AChE活性比较,AD模型组低于正常对照组(P＜0.05),单纯AD电针组高于AD模型组和嗅球损毁电针组(P＜0.05),AD模型组与嗅球损毁电针组之差异无统计学意义(P＞0.05).结论:嗅三针能够显著增强痴呆大鼠学习记忆功能,并且能提高海马ChAT和AChE活性,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性.
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旱莲草对老年痴呆模型大鼠学习记忆及海马神经递质的影响
目的:观察旱莲草对老年痴呆模型大鼠学习记忆能力及海马神经递质的影响.方法:健康成年SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、药物低、高剂量组.皮下注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35构建老年痴呆大鼠模型,各组给予相应药物灌胃治疗8周.用药结束后,观察各组大鼠学习记忆能力、海马神经元形态变化及海马中NE、DA、5-HT的含量和ChAT、AChE的酶学活性.结果:与模型组比较,药物高剂量组潜伏期延长,错误次数降低;海马中锥体细胞形态结构基本正常,细胞脱失现象较少;NE、DA和5-HT含量增高,ChAT活性升高,AChE活性降低.结论:旱莲草可改善老年痴呆模型大鼠学习记忆功能,其机制可能与改善海马神经元形态结构、减少神经元细胞丢失、改善海马中神经递质的代谢有关.
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健脾补肾中药对衰老脑组织中胆碱乙酰转移酶/乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶B影响的研究
目的:观察健脾补肾中药对衰老大鼠脑组织单胺氧化酶B(MAO-B)、胆碱乙酰转移酶/乙酰胆碱酯酶(ChAT/AchE)活性表达的影响.方法:受试动物随机分组并建立亚急性衰老大鼠模型,经健脾补肾中药干预后测定各组大鼠脑组织MAO-B、ChAT/AchE活性变化.结果:与空白组比较,模型组大鼠MAO-B、AchE表达显著升高(P＜0.05),ChAT表达显著降低(P＜0.01),应用健脾补肾中药治疗后,治疗组大鼠MAO-B、AchE表达显著降低(P＜0.05),ChAT表达显著升高(P＜0.05).结论:键脾补肾中药具有调节脑组织单胺类神经递质和胆碱类神经递质代谢而发挥脑功能保护作用.
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多奈哌齐治疗重型颅脑外伤后认知障碍46例临床疗效观察
目的 探讨多奈哌齐对重型颅脑外伤患者认知功能障碍治疗作用及其机制.方法 将92例重型颅脑外伤患者分为常规治疗组和多奈哌齐治疗组,治疗2个月,检测治疗前后Galveston定向力及记忆遗忘评分和Silvir评分,评估认知功能及检测外周血AchE含量,检测治疗前后的双侧大脑中动脉(MCA)血流速度变化.结果 多奈哌齐治疗组认知功能评分提高,增加大脑中动脉(MCA)血流速度,但血AchE无显著变化.结论 多奈哌齐能改善重型颅脑外伤的认知能力.
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跑台上下坡运动对大鼠腓肠肌AChE活性的影响
目的:了解上下坡运动对大鼠腓肠肌AChE活性的影响.方法:30只SD大鼠随机分为三组:对照组(C组)、上坡跑组(EC组)和下坡跑组(EE组)各10只,C组不参加训练,EC组在4°动物跑台上进行上坡跑,EE组在-14°动物跑台上进行下坡跑,均持续8周时间.对大鼠左侧下肢腓肠肌采用AChE染色光镜观察AChE的形态结构,采用计算机图像分析系统对AChE的面积进行定量统计,采用Elisa技术对AChE的含量进行了检测.结果:EE组和EC组比C组的AChE数目多.Elisa 定量测定AChE含量发现,C组与EC组之间有非常显著性差异,EE组与EC组之间有显著性差异,C组与EE组之间无显著性差异.结论:上下坡跑台运动训练后,大鼠腓肠肌AChE的数量增加加快了动作电位的传导速度,改善了大鼠神经系统的功能,对运动有利.
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聪圣胶囊对去皮层血管大鼠行为学及前脑AchE、ChAT的影响
采用去大鼠脑皮层血管建立模型，AchE组化及ChAT免疫组化方法，研究聪圣 胶囊对此模型皮质、海马以及大细胞基底核胆碱能神经元的影响。发现去脑皮层血管大鼠 出现了明显的学习、记忆功能的损害。大鼠皮层损伤侧扣带皮质、海马CA1区AchE阳性纤维 的分布明显稀疏，着色浅。损伤侧的大细胞基底核的AchE、ChAT阳性胆碱能神经元出现了明 显萎缩。聪圣胶囊治疗组大鼠的学习、记忆功能明显改善，皮质、海马AchE阳性纤维分布较 密集，着色加深。大细胞基底核AchE、ChAT阳性神经元的变性、萎缩明显减轻。说明聪圣胶 囊对去皮层血管后造成的皮质、海马、大细胞基底核的损害具有明显的保护和治疗作用。通 过上调胆碱能系统的功能改善学习、记忆功能。
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脑健胶囊防治老年性痴呆神经递质改变实验研究
在腹腔注射D-半乳糖造成大鼠衰老的基础上,双侧海马注射喹啉酸造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型.观察AchEMAO 5-HT的活性,检测脑健胶囊对老年性痴呆大鼠神经递质的影响.结果脑健胶囊能够降低AchE MAO活性,增加5-羟色胺含量,证明脑健胶囊对AD有保护和治疗作用.
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大鼠海马中83KD蛋白诱导神经干细胞向AChE阳性神经元定向分化的作用
目的:探讨海马组织中83KD蛋白诱导神经干细胞向ACHE阳性神经元定向分化的作用.方法:将切割海马伞后14天海马和正常海马组织匀浆进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,根据染色脱色结果取83KD差异蛋白条带进行电洗脱,将收集到的蛋白质加入到鼠胚神经干细胞球培养液中,并设阴性对照组.12天后,用AChE组织化学染色检测神经干细胞分化为AChE阳性神经元的情况.结果:83KD切割组中AChE阳性神经元较多,胞体较大且分化较好,突起较粗且长;83KD正常组中AChE阳性神经元数量较少,胞体较小,突起也较短;空白对照组仅看到少量的AChE阳性神经元,胞体很小,突起短而少.结论:海马中83KD蛋白具有诱导神经干细胞向AChE阳性神经元定向分化的作用.
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美施康定直肠给药控制晚期消化道肿瘤患者癌痛的临床观察
晚期癌症疼痛的发生率高达70%,对晚期消化道肿瘤伴肠梗阻或顽固性恶心、呕吐、吞咽困难的患者,常致口服给药失败.我院自1998年以来,采用美施康定(硫酸吗啡控释片,MST)直肠给药治疗中度及重度癌痛患者48例,取得了较好的疗效,现报告如下.
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静脉穿刺痛疼的影响因素及减轻方法的探讨
静脉穿刺是医疗过程中常用的护理技术,是侵害性操作技术,会给病人带来不同程度的疼痛.随着医学模式的转变,以人为本的服务理念的加强,如何减轻静脉穿刺过程中出现的疼痛,越来越成为医护工作者极力追求的目标.
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百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性影响研究
目的：观察百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性的影响；方法：利用抗AChE活性试验和DPPH清除试验观察百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性影响；结果：三种百合花提取物均有一定的抗AChE作用和抗氧化作用；结论：百合花提取物的抗AChE作用及抗氧化作用可为抗老年痴呆提供新线索。
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七味都气丸对果蝇寿命及小鼠抗衰老作用影响的实验研究
目的:研究七味都气丸对果蝇寿命的影响及D-半乳糖致衰小鼠肝组织超氧化物岐化酶(SOD)活力、脑组织丙二醛(MDA)含量及乙酰胆碱酯酶(AchE)活力的影响.方法:将果蝇随机分为正常对照组、七味都气丸低、中、高剂量组和维生素E组.每24 h记录死亡果蝇数,统计各组果蝇的平均寿命和高寿命;将小鼠随机分为6组,D-半乳糖制造衰老模型,给予维生素E和不同浓度的七味都气丸,6周后测定肝组织中SOD活力、脑组织中AchE活力及MDA含量.结果:七味都气丸可显著提高小鼠体内的SOD 活性,降低AchE活性及MDA含量;延长果蝇平均寿命和高寿命.结论:七味都气丸可有效地清除自由基,阻断了自由基的连锁反应,从而抑制或减轻了肌体组织和细胞的过氧化过程,使肌体各项生理功能得到明显改善,起到抗衰老的作用.
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复方丹参方对拟血管性痴呆大鼠脑内神经递质的影响
目的：探讨复方丹参方对拟血管性痴呆大鼠的治疗作用机理。方法：Wistar雄性大鼠经夹闭双侧颈总动脉(CCA)，并腹腔注射硝普钠(2.5 mg·kg(-1))造模。选术后7d存活的有显著学习记忆障碍的大鼠40只为血管性痴呆模型，随机分为4组。西药组给予喜得镇悬浮液(0.5 mg·kg(-1)·d(-1))，复方丹参大小剂量组给予复方丹参方稀释液(剂量分别为10 g·kg(-1)·d(-1)、5g·kg(-1)·d(-1))，模型组与正常组均给予等容量生理盐水灌胃。连续21天。结果：模型组与正常组比较，模型组大鼠脑内Ach、5-HT含量明显降低，Ach E活性明显升高(P＜0.01)。复方丹参方大剂量组能明显升高Ach含量及5-HT含量，降低脑内AchE活性(P＜0.05，0.01)；复方丹参方小剂量组亦有类似作用，但P＞0.05。与西药组比较无显著差异(P＞0.05)。结论：复方丹参方大小剂量均能改善胆碱能系统的功能，调节脑组织Ach生理代谢，从而改善记忆。
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补肝养髓方对自发老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响
目的观察补肝养髓方对自发老年性痴呆模型学习记忆功能及中枢胆碱能活性的影响.方法用跳台实验(step-down test)从21月龄昆明种小鼠筛选出自发老年性痴呆(记忆障碍)鼠,随机分为4组,即空白对照组、西药对照组、补肝养髓小剂量组、补肝养髓大剂量组,另设老年学习记忆正常组(老年正常组).西药对照组给予喜得镇(Hydergine)0.6 mg/kg,补肝养髓小剂量、大剂量组分别予补肝养髓方6.80 g/kg及20.41 g/kg,连续60 d,正常对照和痴呆对照组均灌以等量双蒸馏水(DW).观察结束后取脑组织冰冻切片,Hedreen法示AChE纤维, Burt及Silver法示ChAT,全自动显微图像分析系统定量检测相关脑区AChE纤维及ChAT活性.结果补肝养髓方能显著增强中枢ChAT活性,增高大脑皮质和海马胆碱能纤维密度,而且其作用呈现出量效相关关系.结论补肝养髓方可显著增强其中枢胆碱能系统活性.
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丹龙醒脑片对拟血管性痴呆大鼠脑组织AchE、ATP酶活性的影响
目的:研究丹龙醒脑片(DLXNP)对拟血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)、三磷酸腺苷酶(ATPase)活性的影响.方法:用双侧颈总动脉反复夹闭再灌注同时腹腔注射硝普钠方法建立拟VD大鼠模型,取脑组织测AchE、ATPase的活性.结果:造模后模型组脑组织内Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性明显降低(P＜0.01),AchE活性明显升高(P＜0.01).与模型组相比,小剂量丹龙醒脑片组AchE活性明显降低(P＜0.01),Ca2+-Mg2+-ATPase活性明显升高(P＜0.05),丹龙醒脑片大、中剂量组Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性显著升高(P＜0.01～P＜0.05),AchE活性明显降低(P＜0.01).结论:丹龙醒脑片能改善脑缺血再灌注后诱导的拟VD大鼠脑组织的能量代谢障碍,防止ATPase活性降低,并可维持乙酰胆碱(Ach)的正常水平,这些作用可能与其抗血管性痴呆有关.
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亚急性砷中毒对脑海马和皮质AChE、NOS活性影响
砷及其化合物广泛存在于自然界,应用于工业、农业和医药等领域.砷中毒引起皮肤过度角化及多系统、多器官损害,导致皮肤或器官癌变.近年来有关砷对中枢神经系统作用越来越引起人们重视,砷能通过血、脑屏障进入脑组织,影响脑中化学物质稳定性,从而引起人的思维、学习和行为变化[1-3].本研究通过建立亚急性砷中毒动物模型,观察大鼠大脑海马和皮质组织中乙酰胆碱脂酶(acetycholinesterase,AChE)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性变化,为探讨砷神经毒性机制和地方病防治提供科学依据.
