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银杏内酯对大鼠胚基底前脑NOS、AchE阳性神经元发育的影响
目的:探讨银杏内酯对大鼠胚基底前脑NOS、AchE阳性神经元发育的影响及可能的作用机制.方法:实验分银杏组、神经生长因子(NGF)组、脑原神经营养因子(BDNF)组和单纯对照组.取孕17天SD大鼠胚基底前脑原基制成细胞悬液接种于96孔培养板和2块24孔培养板中,分别加入含银杏内酯、NGF、BDNF及不含上述成分的DMEM培养液.于体外培养18天后,96孔培养板行MTT比色分析测定光密度值(A值),以检测培养的神经元活力.2块24孔培养板分别行NADPH-d和AchE组织化学染色,显微镜下计数各组每孔中一氧化氢合酶(NOS)、AchE阳性神经元数目,并用CMM-301图像分析系统对两种神经元的细胞面积和细胞周长进行处理,数据用方差分析、SNK检验作统计学处理.结果:银杏组MTT比色分析的A值和NOS、AchE阳性神经元数目、细胞面积、细胞周长等指标均优于单纯对照组,达到或仅稍差于NGF组或BDNF组的指标.结论:银杏内酯在促进大鼠胚基底前脑NOS、AchE阳性神经元发育方面具有类似NGF或BDNF的作用.
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银杏内酯对体外培养的大鼠胚基底前脑神经元凋亡的影响
目的:探讨银杏内酯对体外培养的鼠胚基底前脑神经元凋亡的影响.方法: 实验分成银杏组、NGF组和单纯对照组.取E17d SD大鼠胚基底前脑原基制成细胞悬液接种于2块24孔培养板中,分别加入含银杏内酯、NGF及不含上述成份的DMEM培养液,于体外分别培养18d和30d后,用TUNEL法检测细胞凋亡情况,显微镜下计数各组的凋亡细胞.数据用方差分析和SNK检验进行统计学处理.结果:培养18d和30d两个时期的银杏组凋亡细胞数均明显少于单纯对照组(P<0.01),而略多于NGF组,但其差异无显著性(P>0.05).结论: 银杏内酯具有类似NGF的作用,可有效抑制体外培养的胚基底前脑神经元凋亡.
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神经生长因子和神经节苷脂GM1联合应用对鼠基底前脑胆碱能神经元的保护作用
目的 探讨神经生长因子(NGF)和神经节苷脂GM1联合应用对基底前脑胆碱能神经元是否具有延缓退变的作用.方法 实验分为NGF组、NGF+神经节苷脂GM1组和单纯对照组.取孕20 d SD大鼠胚基底前脑原基制成细胞悬液接种子24孔培养板中,按分组加入NGF、NGF+神经节苷脂GMI和不含神经营养因子的DMEM培养液,分别于体外培养12、18、24、30 d后进行乙酰胆碱酯酶组织化学反应.显微镜下计数各孔中乙酰胆碱酯酶阳性神经元数,每孔随机测量和计数20个乙酰胆碱酯酶阳性神经元的平均胞体直径、发出的突起数和长突起长度.数据用方差分析和SNK检验进行统计学处理.结果 在培养的4个时期,NGF组和联合组的各项数据均明显优于单纯对照组,神经节苷脂GM1+NGF组的各项数据,特别是长突起长度优于单独使用NGF组.结论 NGF和神经节苷脂GM1联合应用及NGF单独应用不仅对体外培养的胚胆碱能神经元发育生长具有促进作用,而且还可延缓体外长期培养的人鼠胚基底前脑胆碱能神经元的退变;联合应用效果更佳.
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BDNF、NGF对体外长期培养的胚基底前脑胆碱能神经元的影响
本文探讨了脑源性神经营养因子、神经生长因子对体外长期培养的胚基底前脑胆碱能神经元是否具有延缓退变的作用.实验分为脑源性神经营养因子组、神经生长因子组、脑源性神经营养因子加神经生长因子组及单纯对照组.取孕17 d SD大鼠胚基底前脑原基制成细胞悬液接种于24孔培养板中,按分组加入含相应神经营养因子和不含神经营养因子的DMEM培养液,分别于体外培养12、18、24、30 d后进行乙酰胆碱酯酶组织化学反应.显微镜下计数各孔中乙酰胆碱酯酶阳性神经元数,每孔随机测量和计数25个乙酰胆碱酯酶阳性神经元的平均胞体直径、发出的突起数和长突起长度.数据用方差分析和SNK检验进行统计学处理.结果显示,在培养的4个时期,含脑源性神经营养因子组、神经生长因子组和脑源性神经营养因子加神经生长因子组的各项数据均明显地优于单纯对照组;脑源性神经营养因子加神经生长因子组的各项数据,特别是长突起长度优于单独使用脑源性营养因子或神经生长因子组.提示:脑源性神经营养因子和神经生长因子不仅对体外培养的胚胆碱能神经元发育生长具有促进作用,而且还可延缓体外长期培养的大鼠胚基底前脑胆碱能神经元的退变;两者的联合使用还可对延缓其退变具有协同作用.
