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全人源抗Trop-2IgG的制备及对卵巢癌细胞生物特性的影响
目的:构建全人源抗人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)抗体IgG真核表达系统,表达并纯化该抗体,并检测其对卵巢癌细胞生物特性的影响.方法:构建全人源抗Trop-2抗体IgG的重组表达载体;在293 FreeStyle (293F)真核表达体系中表达并纯化该抗体.使用SDS-PAGE、ELISA、亲和力测定、免疫荧光等方法鉴定该抗体并分析其免疫学活性;使用cell counting kit-8(CCK-8)法、划痕实验、Transwell实验和细胞凋亡实验分析其对卵巢癌细胞特性的影响.结果:成功制备出全人源抗Trop-2 IgG;经多种方法检测,该抗体能与Trop-2蛋白特异性结合;对表达Trop-2的卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡有明显影响.当抗体浓度为400 μg/mL时,卵巢癌细胞HO8910的生存率仅为55.95%(P< 0.01),划痕愈合率仅为24.71%(对照组为70.80%,P< 0.01),侵袭细胞数是对照组的32.11%(P< 0.05),细胞凋亡率是对照组的2倍(P<0.05).结论:全人源抗Trop-2 IgG可特异性识别卵巢癌细胞表面的Trop-2蛋白,对卵巢癌细胞的恶性行为具有明显的抑制作用.因此,全人源抗Trop-2 IgG在卵巢癌的靶向治疗中有潜在应用价值.