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RNASEH2A文献资料
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pWPXL-RNASEH2A-GFP，pWPXL-RNASEH2A和pWPXL-RNASEH2A-HA慢病毒表达载体的构建
目的：构建pWPXL-RNASEH2A-GFP，pWPXL-RNASEH2A和pWPXL-RNASEH2A-HA慢病毒过表达载体。方法：通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction, RT-PCR)技术扩增人RNASEH2A基因的蛋白编码区(coding domain sequence, CDS)，将纯化的PCR产物连接到pWPXL慢病毒表达载体，将3种重组载体与包装质粒共同转染HEK293T细胞，收集病毒上清液；再次感染HEK293T细胞并收集细胞蛋白，通过Western Blot检测RNASEH2A蛋白的表达水平。结果：Western Blot结果显示RNASEH2A抗体、GFP抗体和HA抗体均能检测到过表达的RNASEH2A或RNASEH2A融合蛋白。结论：成功构建了可用于哺乳动物细胞的pWPXL-RNASEH2A，pWPXL-RNASEH2A-GFP和pWPXL-RNASEH2A-HA慢病毒表达载体。
