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抗CD71人-鼠嵌合抗体文献资料
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转铁蛋白受体介导的肝癌靶向性HSV-tk/GCV系统的构建及体外效应研究
目的:构建肝癌靶向性HSV-tk/GCV基因转移系统,并研究其在体外对肝癌细胞的杀伤效应.方法:体外培养通过基因重组技术构建和表达抗转铁蛋白受体(TfR)人-鼠嵌合抗体的转染瘤细胞D2C5.6,诱导裸鼠(Balb/c,nu/nu)产生腹水并纯化;以蛋白质连接因子-水溶性碳二亚胺(EDC)介导TfR的抗体与多聚左旋赖氨酸的连接(Ab-PLL),与pEBAF/ tk按比例混匀,得到Ab-PLL-pETAF/tk基因转移系统;分别转染不同的细胞株进行体外效应研究:人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721,人肺癌细胞株549,观察给予不同浓度的更昔洛韦(GCV)随时间延长的细胞改变情况,用MTT法检测GCV对不同细胞的杀伤作用.结果:分析型酸性尿素凝胶电泳证实抗TfR的抗体与PLL成功连接;体外杀伤实验显示:经Ab-PLL-pETAF/tk基因转移系统处理的3种细胞对GCV表现出不同的敏感性.HepG2细胞(CD71,AFP)对GCV很敏感,低浓度的GCV(1mg/L)处理3d,即可使细胞生长抑制率达到74.8%,SMMC7721细胞(CD71,AFP+)对GCV低度敏感,A549(CD71-,AFP-)对GCV不敏感.结论:TfR介导的肝癌靶向性HSV-tk/GCV基因转移系统构建成功;有可能用以肝癌细胞为靶细胞的基因治疗的研究.
关键词： 肝癌细胞 基因治疗 Tk基因 靶向性 抗CD71人-鼠嵌合抗体
