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  • 突触后致密部蛋白PSD-93与SynGAP相互作用位点的鉴定

    作者:张清秀;高红;魏秀娥;刘震乾;荣良群

    目的:鉴定突触后致密部蛋白PSD-93与SynGAP结合位点。方法分别构建PSD-93、SynGAP质粒,免疫印迹检测各个重组质粒是否表达,免疫共沉淀检测PSD-93与SynGAP的结合情况;分别缺失突变PSD-93的95-105aa和170-190aa残基以及SynGAP的670-685aa残基,免疫印迹检测各个突变质粒是否表达,免疫共沉淀检测两者的结合情况。结果 PSD-93(1-199aa)-HA可在细胞中过表达,PSD-93(1-109aa)-HA不表达或者表达蛋白不稳定;SynGAP的3个质粒均可在细胞内过表达;PSD-93(1-199aa)均可与SynGAP的3个片段相结合。 PSD-93(1-199aa)缺失突变95-105aa片段后,可在细胞内过表达,且与SynGAP的3个片段均可结合,而敲除170-190aa片段则不能与SynGAP蛋白结合;同样,突变SynGAP(670-685aa)片段则不能与PSD-93蛋白结合。结论 PSD-93与SynGAP结合的位点分别位于PSD-93的170-190aa序列以及SynGAP的670-685aa序列。

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