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罗格列酮对RIN-m细胞高糖损害干预作用研究
目的 研究罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对胰岛β细胞高糖损害的干预作用.方法 采用生理浓度葡萄糖(5.5 mmol/L)、生理浓度葡萄糖+罗格列酮、高浓度葡萄糖(33.3 mmol/L)、高浓度葡萄糖+罗格列酮培养RIN-m细胞.以放射免疫法检测胰岛素分泌水平.以流式细胞仪及TUNEL法检测RIN-m细胞凋亡.RT-PCR方法 检测胰腺十二指肠同源盒-1(pancreatic duodenal homeobox factor-1,PDX-1)和胰岛素mRNA表达.结果 ①RIN-m细胞与33.3 mmol/L的葡萄糖孵育2周后胰岛素分泌功能开始下降,细胞凋亡率增长2.7倍(P＜0.01).而罗格列酮可以修复胰岛素的分泌,降低RIN-m细胞凋亡率.②罗格列酮上调 PDX-1(1.30±0.06 vs. 1.61±0.10,P＜0.01)和胰岛素 (1.75±0.09 vs. 1.98±0.11,P＜0.01) mRNA表达.结论 高糖抑制胰岛β细胞胰岛素分泌,并诱导其凋亡.罗格列酮具有直接保护β细胞免于高糖毒性的作用.
关键词： 罗格列酮 RIN-m细胞 凋亡 胰腺十二指肠同源盒-1 -
大鼠骨髓间充质干细胞Pdx-1基因表达水平的调控及意义
目的:将含有胰腺十二指肠同源盒-1(pancreatic duodenal homeobox-1,Pdx-1)的真核表达载体转染大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),并测定转染MSCs中Pdx-1基因的拷贝数.方法:将本实验室构建的含Pdx-1的真核表达载体pcDNA3.1-Pdx-1,转染MSCs,RT-PCR检测MSCs中Pdx-1的表达,实时荧光定量PCR检测Pdx-1基因的拷贝数.结果:构建的含Pdx-1的真核表达载体能有效的转染MSCs,并检测到该基因mRNA的表达.筛选并检测2株稳定转染细胞株Pdx-1基因的拷贝数分别为3.73、1.23.结论:成功将含有Pdx-1基因真核表达载体转染MSCs.
关键词： 胰腺十二指肠同源盒-1 骨髓间充质干细胞 转染 真核表达 拷贝数
