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  • nm23-H1-绿色荧光蛋白融合基因真核表达载体的构建和表达

    作者:车国卫;周清华;刘伦旭;覃杨;孙芝琳

    目的:构建包含人野生型nm23-H1cDNA和绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pLXSN-nm23-H1- EGFP,用以研究nm23-H1逆转肺癌转移表型的分子机制. 方法:应用基因工程和分子克隆技术,将nm23-H1-EGFP基因克隆到真核表达载体pLXSN中,得到真核重组载体pLXSN-nm23-H1-EGFP;脂质体法转染包装细胞系PA317,得到包含nm23-H1-EGFP的逆转录病毒,并感染人肺癌细胞株L9981. 结果:构建了pLXSN-nm23-H1-EGFP逆转录病毒真核表达载体,L9981细胞能够表达nm23-H1-EGFP融合蛋白. 结论:成功构建真核表达载体pLXSN-nm23- H1-EGFP,并能在L9981细胞中持续、稳定和高效表达nm23-H1-EGFP融合蛋白.

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