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人骨形成蛋白-7基因在人骨髓间充质干细胞中的表达和对其分化表型的影响
目的:观察人骨形成蛋白-7(BMP-7)基因在人骨髓间充质干细胞(hMSC)中的表达及对其成骨表型的影响. 方法:利用AdEasy腺病毒表达系统构建人BMP-7基因表达腺病毒AdB7V,体外感染hMSC后观察绿色荧光蛋白(GFP)表达及RT-PCR、免疫组化方法鉴定外源基因的表达,通过对感染细胞的碱性磷酸酶(ALP)染色和钙盐染色鉴定其成骨分化表型. 结果:hMSC经AdB7V感染后72 h可观察到GFP表达,RT-PCR、免疫细胞化学方法证实外源性BMP-7在hMSC中表达,感染细胞的ALP染色和钙盐染色均为阳性. 结论:外源性的人BMP-7基因可在hMSC中表达并诱导其向成骨细胞分化.
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人BMP-7及VEGF基因共表达腺病毒的构建及在兔骨髓基质干细胞中的共表达
目的:构建人BMP-7及VEGF165基因共表达腺病毒并观察其在兔骨髓基质干细胞(rBMSC)中的表达.方法:利用AdEasy腺病毒表达系统构建人BMP-7及VEGF165基因共表达腺病毒AdB7V,体外感染rBMSC后通过观察绿色荧光蛋白表达及RT-PCR、免疫组化方法鉴定外源基因的表达.结果:rBMSC经AdB7V感染后72h可观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,RT-PCR、免疫细胞化学方法证实外源性BMP-7及VEGF165基因均可在rBMSC中表达.结论:成功构建人BMP-7及VEGF165基因共表达重组腺病毒,证实了其在rBMSC的表达,为骨再生的局部联合基因治疗打下基础.