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荧光RT -PCR文献资料
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EV71、CA16和肠道病毒通用型三重荧光RT －PCR 检测技术的建立
目的：建立一种可以同时检测 EV71、CA16和肠道病毒通用型的三重荧光 RT －PCR 检测方法，为手足口病监测与应急诊断提供高通量快速检测技术。方法分别在 VP1和5’UTR 基因保守区设计 EV71、CA16和肠道病毒通用型的特异性检测引物以及 Taqman 探针，建立并评估三重荧光 RT －PCR 技术的特异性和敏感性，并对91份疑似手足口病患儿临床标本进行核酸检测与效果验证。结果建立的三重荧光 RT －PCR 技术可同时对EV71、CA16和肠道病毒通用型进行特异性检测区分，敏感性均可达到0.1 TCID50／mL，从核酸提取至完成检测仅需2～3 h。91份疑似手足口病患儿临床标本采用三重荧光 RT －PCR 方法检测，EV71、CA16和其他型别肠道病毒的检出率分别为30.77％、9.89％和5.49％；荧光 RT －PCR 方法的检出率高于培养分离法。结论建立的三重荧光 RT －PCR 技术能同时准确分型 EV71、CA16和其他型别肠道病毒。
