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Par3蛋白对体外培养子宫颈癌SiHa细胞生物学性状的影响
目的 探讨Par3蛋白对子宫颈癌SiHa细胞生物学性状的影响.方法 采用基因过表达和RNA干扰技术分别上调和下调子宫颈癌SiHa细胞中PARD3的表达;qRT-PCR和Western blot法检测PARD3 mRNA和Par3蛋白水平变化.Transwell小室体外实验检测其对SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响;应用流式细胞术分析其对SiHa细胞周期及凋亡的影响.结果 SiHa细胞转染基因PARD3过表达质粒后mRNA和蛋白表达水平显著增高,PARD3 siRNA干扰SiHa细胞后PARD3 mRNA和Par3蛋白表达水平显著降低;Transwell小室体外实验表明Par3过表达后细胞侵袭、迁移能力降低,而经干扰组蛋白表达下调后细胞侵袭、迁移能力增强;流式细胞术检测提示与空白对照组相比,PARD3基因被干扰后细胞被阻滞在S期,干扰组细胞凋亡率明显降低(P＜0.01).然而,上调PARD3的表达后细胞被阻滞在Go/G1期,过表达组细胞凋亡率明显增高(P＜0.01).结论 Par3蛋白参与子宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移、侵袭以及凋亡的过程,PARD3基因的异常低表达很可能对子宫颈癌的发生、发展以及侵袭、转移起促进作用.
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极性蛋白PARD3对结直肠癌转移的影响
目的 观察极性蛋白PARD3在结直肠癌转移中的作用.方法 应用免疫组织化学和Western blot检测38例结直肠癌组织标本中PARD3的表达,探讨PARD3与临床病理特征的相关性.实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot分别检测结直肠癌细胞中PARD3中的表达.通过RNA干扰技术敲除PARD3后,检测上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达变化及Transwell实验检测细胞迁移能力的改变.结果 结直肠癌组织中PARD3表达水平明显低于正常切缘组织(0.33±0.03比0.47±0.03).PARD3低表达与患者性别、年龄及肿瘤浸润程度无明显相关(P =0.209、0.405、1.000),而与淋巴结转移明显相关(P=0.013).PARD3在结直肠癌细胞株中均表达,其中SW620和LoVo中PARD3表达水明显低于其他结直肠癌细胞.SW480和LoVo细胞敲除PARD3后,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达降低,N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达升高.Transwell实验显示小干扰RNA (siRNA)转染组中细胞穿过膜的数量明显多于对照组(214.00±35.93比66.00±13.45、521.00±26.27比146.00 ±23.29).结论 PARD3表达下调促进结直肠癌转移.
