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高压高温预处理文献资料
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实时控制FISH预处理中酶消化的操作
荧光原位杂交( fluorescence in situ hybridization, FISH)是通过荧光素标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交,在荧光显微镜下观察探针的杂交信号。在产前诊断、肿瘤遗传学等领域研究得到广泛应用。然而在FISH检测过程中,有多种因素(如组织标本的固定、切片厚度、酶的消化、杂交后洗涤)影响检测结果。其中影响多的是蛋白酶的预处理,即蛋白酶的种类及消化时间[1-8]。作者在实验中发现,控制消化时间固然重要,但掌握组织或细胞消化的程度更重要。实验中预处理控制水浴温度、酶消化时间,均要达到组织去蛋白的效果,否则难以做出信号满意的FISH标本。本文采用镜下直接观察消化的组织或细胞,判定消化程度,结合消化时间来决定是否终止消化,有效保证FSIH检测的成功,现介绍如下。
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高压高温预处理后FISH法检测子宫颈病变组织中hTERC基因
在子宫颈癌的筛查中,人端粒酶基因(human telomerase RNA gene ,hTERC)成为继细胞学、HPV检测后的又一指标,发生hTERC基因扩增的病变,继续发展成子宫颈癌的可能性增加.在妇科临床应用中,多用于细胞学标本的检测;而在子宫颈病变组织原位检测hTERC基因,探讨病变组织细胞形态学改变与其遗传学改变之间的关系,进而提高不典型病变诊断的准确性,这方面的研究报道不多.
关键词： 子宫颈病变 荧光原位杂交(FISH) 高压高温预处理 hTERC
