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甲基苯丙胺依赖对大鼠纹状体RGS4和mGluR5受体信号传导的影响
目的:研究甲基苯丙胺依赖不同时间对大鼠脑纹状体内G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signaling 4,RGS4)和代谢型谷氨酸受体5(metabotropic receptor 5,mGluR5)信号传导的影响.方法:建立大鼠甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)依赖一周组(1W)、两周组(2W)模型,Western blot技术检测大鼠纹状体内RGS4、mGluR5、G蛋白α亚单位蛋白Q(Gαq)、磷脂酶C-β1(phospholipase C-β,PLCβ1)表达水平.结果:METH依赖1W、2W组伴药箱停留时间比生理盐水对照组增加,提示METH依赖模型建成.模型组大鼠纹状体内RGS4蛋白表达水平较生理盐水对照组相比明显下调,而模型组mGluR5蛋白和Gαq蛋白、PLCβ1蛋白表达与生理盐水对照组比较均有不同程度上调,且2W组较1W组改变更明显.结论:METH给药可能导致大鼠脑纹状体内RGS4表达下调,mGluR5表达上调,还可使与mGluR5偶联的Gαq、PLCβ1表达均出现不同程度上调.且METH依赖时间越长,RGS4、mGluR5、Gαq、PLCβ1的表达水平变化越显著.
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RGS4和D2受体信号通路相关分子在甲基苯丙胺依赖CPP大鼠纹状体的表达变化
目的:研究甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)依赖条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)实验大鼠纹状体G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signal 4,RGS4)和多巴胺D2受体(dopamine receptor D2)信号通路相关分子的表达变化.方法:建立METH依赖CPP大鼠1周组、2周组,应用蛋白质印迹(Western blot)测定各组大鼠纹状体RGS4和D2、抑制性G蛋白α亚基(inhibitory G protein α-subunit,Gαi)、丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)蛋白表达的变化;应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组大鼠纹状体环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)含量的变化.结果:与生理盐水对照组相比,METH依赖1周组、2周组大鼠在伴药箱的平均停留时间明显延长(P＜0.05).与生理盐水对照组相比,RGS4蛋白在METH依赖1周、2周组的表达均明显下降(P＜0.01),且与METH依赖1周组相比,2周组的下降更为明显(P＜0.05);与生理盐水对照组相比,D2、Gαi、MAPK蛋白以及cAMP在METH依赖1周、2周组的表达均明显升高(P＜0.01),且与METH依赖1周组相比,2周组的升高更为明显(P＜0.05).结论:在METH依赖的CPP大鼠纹状体中,RGS4和D2受体信号传导通路相关分子发生了改变,RGS4可能参与了METH依赖的CPP大鼠纹状体D2受体信号传导通路的调节.
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阿片受体信号调节相关蛋白RGS4及β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中的表达变化
目的 探讨泻剂结肠大鼠结肠中阿片受体信号调节相关蛋白RGS-4和β-arrestin2的表达变化及意义.方法 7～8周龄Wistar大鼠16只,体质量(200 ±20)g,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组(n=8)及泻剂结肠组(n=8),饲养环境温度18 ～ 28℃,相对湿度40％ ～ 80％.对照组饲以普通软饲料,泻剂结肠组饲以混有酚酞的饲料,建立泻剂结肠大鼠模型.通过RT-PCR及Western blot方法对RGS-4和β-arrestin2在结肠中的表达进行相对定量分析.结果 两种阿片受体信号调节蛋白在泻剂结肠组及对照组大鼠结肠内均有不同程度的表达.RT-PCR结果显示泻剂结肠组RGS-4和β-arrestin2 mRNA相对表达水平均明显高于对照组[(3.4183 ±0.2474) vs(0.9876 ±0.0341),(2.9744±0.2142) vs(0.9211 ±0.0401),P＜0.01].Western blot检测结果显示RGS-4和β-arrestin2的表达在泻剂结肠组较对照组明显升高[(0.4034±0.0499)vs(0.1153 ±0.0102),(0.9139±0.0611)vs(0.4676±0.0437),P＜0.01].结论 RGS-4和β-arrestin2、在泻剂结肠大鼠结肠中表达均明显增强,提示其可能增强泻剂结肠大鼠结肠MOR信号传导调节功能.
