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罗仙子提取物对单核细胞与血管内皮细胞黏附的影响
目的:考察罗仙子提取物对单核细胞与血管内皮细胞黏附的影响.方法:制备相对分子质量30 000以下罗仙子提取物;考察罗仙子提取物对血管内皮细胞EA.hy926活力的影响;肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导建立单核细胞THP-1和EA.hy926黏附模型,采用虎红染色,考察不同浓度罗仙子提取物对EA.hy926与THP-1黏附性的影响;采用ELISA考察罗仙子提取物对TNF-α诱导的EA.hy926分泌单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的影响.结果:罗仙子提取物(浓度≤4×102 μg/mL时)对EA.hy926未见明显的增殖或抑制作用(P＞0.05);罗仙子提取物(浓度≥6.25 μg/mL时)可浓度依赖性降低两细胞之间的黏附作用;罗仙子提取物各浓度均能显著地降低TNF-α诱导的MCP-1表达(P＜0.01),罗仙子提取物(浓度≥50 μg/mL时)可显著地降低TNF-α诱导的VCAM-1的表达(P＜0.01).结论:罗仙子提取物可通过抑制TNF-α诱导的内皮细胞分泌MCP-1和VCAM-1,阻滞单核细胞与血管内皮细胞之间的黏附作用,从而发挥抗动脉粥样硬化作用.
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不同提取方法对中药罗仙子体外抑菌活性的影响
目的 研究不同提取方法对罗仙子提取物体外抗菌活性的影响.方法 采用水提法、盐提法、醇提法和碱提法获得罗仙子蛋白提取物,结合K-B纸片琼脂扩散法和TTC微量稀释法比较四种方法所获提取物的抗菌活性.结果 碱提法所获提取物产率高;水提法所获产物出现抑菌圈的浓度小于盐提法、醇提法和碱提法,且大肠埃希菌出现抑菌圈浓度小于金黄色葡萄球菌出现抑菌圈浓度;水提法所获产物的小抑菌浓度(MIC)和小杀菌浓度(MBC)均小于盐提法和醇提法和碱提法产物,且针对大肠埃希菌的MIC和MBC均小于针对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC.结论 水提法、盐提法、醇提法和碱提法均能获得一定量的罗仙子蛋白提取物,其中水提法所获产物的抑菌活性优,且对大肠埃希菌的敏感性高于金黄色葡萄球菌.
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传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎作用影响的比较
目的:比较传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎活性的影响.方法:以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7为实验对象,比较传统炮制及现代加工制品的抑菌及抗炎作用.结果:现代加工制品的抑菌抗炎作用优于传统炮制品.结论:现代加工工艺能够有效的保护罗仙子中抑菌及抗炎物质的活性.
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中药罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位氨基酸HP LC指纹图谱分析
目的：构建中药罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位氨基酸指纹图谱,为明确其氨基酸组成及建立其质量控制方法提供实验依据。方法用2,4-硝基氟苯柱前衍生法建立罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位水解氨基酸的HPLC指纹图谱,优化衍生条件。结果衍生剂量为1%(体积分数)2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB )乙腈溶液1.0 mL、衍生温度为60℃、衍生时间为60 min时,衍生化完全；样品水解氨基酸中谷氨酸和精氨酸的质量分数较高,均大于5%；HPLC指纹谱图共确定24个共有峰,10批样品相似度在0．99~1．00之间。结论本方法稳定、可靠,重复性好,明确了罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位的氨基酸组成,并初步建立了该部位的质量控制方法。
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中药罗仙子小分子多肽抗氧化活性部位的筛选、分离与评价
目的 筛选中药罗仙子小分子多肽中的抗氧化活性部位并对其抗氧化活性进行初步评价.方法利用薄层-生物自显影技术筛选和分离罗仙子小分子多肽中抗氧化活性部位;测定该抗氧化活性部位对DPPH自由基、OH自由基和ABTS自由基的清除率;以H2 O2氧化损伤人脐静脉内皮细胞ECV304为模型,测定罗仙子抗氧化活性部位对内皮细胞SOD、GSH-Px活力及MDA含量的影响.结果根据DPPH-TLC法筛选到罗仙子小分子多肽抗氧化活性部位主要集中S1部位,该部位具有较好的清除自由基能力;S1部位可提高H2O2氧化损伤ECV304细胞的SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量.结论TLC-DPPH技术可有效筛选和分离罗仙子小分子多肽中抗氧化活性部位,且该部位具有较好的体外抗氧化活性.
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中药罗仙子不同分子量多肽对血管内皮细胞生物学功能的影响
目的：探讨罗仙子不同分子量多肽对人脐静脉内皮细胞（ HUVEC）生物功能的影响。方法葡聚糖凝胶过滤色谱分离获得罗仙子高、中、低分子量多肽；以肿瘤坏死因子-α（ TNF-α）诱导HUVEC为研究对象，采用流式细胞术、细胞划痕实验、ELISA法检测细胞增殖、迁移和血管内皮生长因子（ VEGF）分泌情况。结果高、中、低分子量罗仙子多肽处理的HUVEC的增殖、迁移及VEGF分泌均得到一定的抑制，其中低分子量罗仙子多肽对HUVEC的生物学功能影响为显著，而高分子量罗仙子多肽对降低VEGF分泌的影响差异无统计学意义。结论相对高、中分子量多肽，罗仙子低分子量多肽能更有效的抑制TNF-α诱导的HUVEC增殖、迁移及VEGF分泌。
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中药罗仙子抗炎活性部位对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞增殖及Matrigel小管形成的影响
目的 以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为研究对象,探讨罗仙子(Musca Domestica)抗炎活性部位在体外对HUVEC增殖及Matrigel小管形成的影响.方法 将构建的HUVEC细胞分为正常对照组、模型组及罗仙子活性部位处理组,制备罗仙子抗炎活性部位,采用流式细胞术结合ModFit LT软件分析,明确罗仙子抗炎活性部位对HUVEC增殖的影响;采用Matrigel小管形成实验结合Image Pro Plus软件分析,明确罗仙子抗炎活性部位对HUVEC血管形成的影响.结果 相对模型组,罗仙子抗炎活性部位处理组HUVEC增殖得到显著的抑制,增殖系数降低明显(P＜0.01),同时,该处理组Matrigel小管形成的数量、面积和长度显著减少(P＜0.01).结论 罗仙子抗炎活性部位对TNF-α诱导HUVEC增殖及Matrigel小管形成具有抑制作用.
关键词： 罗仙子 人脐静脉内皮细胞 增殖 Matrigel小管
