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Westernblot技术文献资料
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卡维地洛对HERG钾通道电生理功能及蛋白表达的影响
目的 探讨卡维地洛对稳定转染HERG基因的HEK(human embryonic kidney)293细胞上的HERG钾通道的影响.方法 应用全细胞膜片钳技术记录在HEK293细胞上稳定表达的HERG钾通道的电流和动力学曲线(激活、失活、复活和去激活 ),研究不同浓度卡维地洛对HERG电流及动力学的影响;用Western blot技术定量的观察不同浓度卡维地洛对定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道蛋白表达的影响.结果卡维地洛(10、100 nmol*L-1,1、10 μmol*L-1)浓度依赖性的抑制HERG步阶电流(Istep)及其尾电流(Itail).由Hill方程得出IC50为539.6 nmol*L-1,Hillslope为-0.64.1 μmol*L-1卡维地洛作用后瞬时失活、去激活时间常数明显降低(P<0.05,n=10),而激活、失活、复活动力学无明显改变;Western blot检测结果显示卡维地洛组与无加药对照组HERG蛋白的表达无差别.结论卡维地洛通过影响通道的开放状态抑制HERG钾电流,加速瞬时失活和去激活动力学,对HERG蛋白的表达及成熟无影响.
关键词： 卡维地洛 HERG钾通道 膜片钳技术 Westernblot技术
