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土槿皮乙酸B不通过Fas途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和M期周期阻滞
目的 初探土槿皮乙酸B(PAB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡和周期阻滞.方法 MTT法测定PAB 对MCF-7细胞的生长抑制情况;相差显微镜观察细胞形态变化;荧光显微镜观察经Hoechst 33258 染色的 DNA 变化;流式细胞仪检测用PI染色后MCF-7细胞的周期分布;免疫印迹实验检测相关蛋白的表达.结果 PAB时间剂量依赖性的抑制MCF-7细胞生长. 4 μmol·L-1 PAB在24 h使DNA皱缩,在36 和48 h 使DNA皱缩的细胞死亡.4 μmol·L-1 PAB 时间依赖性的促进PARP[poly-(ADP-ribose) polymerase]的剪切.在36 h PAB 剂量依赖性的增加cdc 2 和核内cyclin B1 的表达.Fas 拮抗性抗体UB2不影响PAB诱导的凋亡,但Fas激动性抗体CH11促进PAB诱导的凋亡.并且UB2不影响PAB诱导的细胞周期阻滞,Fas激动性抗体CH11不影响G1和S期,但促进凋亡特征性的亚二倍体峰生成. 结论 4 μmol· L-1的PAB通过凋亡方式可明显地抑制MCF-7细胞生长,并促进M期阻滞.Fas途径不参与PAB诱导的凋亡和周期阻滞.
关键词: 土槿皮乙酸B(PAB) 凋亡 M期阻滞 人乳腺癌MCF-7细胞