您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
ROP16基因文献资料
-
弓形虫棒状体ROP16基因转染RAW264.7的实验研究
目的 比较目前常用的5种基因导入技术将弓形虫棒状体ROP16基因导入RAW264. 7,选择合适的方法提高转染效率. 方法 以绿色荧光蛋白pEGFP-ROP16融合表达构建质粒,采用 Lipofectamine? 3000 、Attractene 、Fugene? HD转染试剂以及电穿孔转染和慢病毒载体感染RAW264. 7,利用荧光显微镜和流式细胞仪观察目的基因的表达、细胞生长状态并分析转染效率,从而确定佳的基因导入途径. 结果上述质粒载体对RAW264. 7的转染效率依次为电转法>Fugene? HD>Lipofectamine? 3000>Attractene. 但是电转法转染后细胞死亡率较高,细胞贴壁不牢或死亡;而慢病毒感染效率可达61. 2%,细胞生长状态佳,显著优于质粒载体( P<0. 05). 慢病毒组显著优于4个质粒组(P<0. 05). 结论慢病毒感染可将弓形虫棒状体 ROP16 成功转入RAW264. 7,具有较高的转染效率,效果显著优于质粒载体,目的基因在细胞内获得高效表达. 为弓形虫ROP16的功能研究提供了重要基础.
