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人胚胎干细胞培养体系的研究进展
人胚胎干细胞(hESC)具有显著的增殖能力和分化潜能,已经成为研究再生医学、药物学、药理毒理学、人胚胎发育学和功能基因组学的种子细胞库.hESC在长期维持培养中保持增殖潜能和未分化状态需要饲养层细胞或基质蛋白、血清或基因敲除血清(KSR)以及碱性成纤维生长因子、骨形态蛋白、转化生长因子、激活素A等生长因子.本文就hESC培养体系的传统小鼠胚胎成纤维细胞饲养层、人源性饲养层、Matergel胶、KSR取代血清、在基质中加入明确的不同的细胞因子等培养方案和hESC的组织工程学应用的研究现状及进展作一综述.
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小鼠早胚体外培养成分确定培养基的实验研究
目的:建立小鼠早胚体外培养成分确定培养基,并与传统培养基对小鼠早胚发育的效果进行比较.方法:用添加不同浓度聚乙烯醇(polyvinyl alcoho,PVA)和不同浓度氨基酸的CZB培养基和添加输卵管细胞、胎牛血清(fetal cattle serum,FCS)或牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)培养基培养小鼠早胚,观察它们对囊胚发育的影响.结果:含0.05 mg/ml PVA、0.5×必需氨基酸(essential aminoacids solution,EAA)和0.5×非必需氨基酸(non-essential amino acids solution,NEAA)的CZB培养基可有效防止胚胎粘连,其总囊胚和扩张囊胚发育率显著高于其余各氨基酸添加组和对照组.尽管该培养基的总体发育效果低于输卵管细胞添加组,但其总囊胚发育率与BSA添加组差异无统计学意义,而且明显高于胎牛血清添加组.其扩张囊胚发育率与胎牛血清添加组差异无统计学意义.结论:小鼠早胚在含0.05 mg/ml PVA和0.5×EAA及0.5×NEAA的成分确定的CZB培养基中具有与在BSA添加培养基中相同的囊胚发育能力,且具有与在血清添加培养基中相同的扩张囊胚发育能力.
