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  • 布鲁氏菌BP26蛋白的表达纯化及其抗原性的研究

    作者:宫晓炜;景涛;王国治;李恪梅;王秉翔;傅林锋

    目的 获得布鲁氏菌感染血清学诊断优势抗原BP26重组蛋白.方法 应用PCR技术从布鲁氏菌减毒株(104M)中扩增出bp26目的 基因片段,将其克隆于表达载体PET30a中,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,用亲和层析纯化BP26重组蛋白,然后分别用Western-blot,间接ELISA检测其抗原性.结果 DNA测序及酶切鉴定证实PET-30a/bp26原核表达载体构建成功,并在大肠杆菌中高效表达,免疫印迹和间接ELISA实验证明BP26重组蛋白可与布鲁氏菌阳性血清产生特异性结合.结论 成功获得了布鲁氏菌中序列全长为696bp,编码232个氨基酸的BP26蛋白,通过血清学反应证实,该蛋白为人和动物布鲁氏菌病临床诊断试剂盒的研发奠定了基础.

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